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    2016年, 第33卷, 第4期 刊出日期:2016-08-18 上一期    下一期
    研究报告
    枝状枝孢霉MD2的Unigene A09801克隆与原核表达分析
    席晓圆, 张 鹏, 宋发军, 于鹏飞, 王琦, 孟艳艳
    2016 (4):  1. 
    摘要 ( 206 )   PDF  
    真菌紫杉醇合成酶类基因的功能研究是构建紫杉醇高产工程菌株的前提。首次从产紫杉醇真菌——枝状枝孢霉MD2中克隆了Unigene A09801的DNA和cDNA全长序列(1674 bp),该基因不含有内含子,其编码产物含557个氨基酸,与GMC (glucose-methanol-choline) oxidoreductase一致性为56%,蛋白分子质量为61 291.8 u,等电点为5.47,不存在跨膜结构和信号肽。Unigene A09801以单拷贝方式存在于基因组中,其表达量受茉莉酸甲酯诱导表现出先降低后升高再降低的趋势,最高表达量出现在24 h。构建了Unigene A09801的原核表达载体,并初步优化其表达条件为:诱导温度32 ℃,IPTG 浓度1.2 mmol/L,诱导时间4 h。结果为体外(in vitro)分析该基因编码蛋白的催化功能奠定了基础。
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    香鱼ApoC-Ⅰ的克隆、序列分析及其镉胁迫下的表达
    陈亚萍, 丁斐斐, 李长红, 默立宾, 陈 炯
    2016 (4):  5. 
    摘要 ( 216 )   PDF  
    载脂蛋白C-Ⅰ (Apolipoprotein C, ApoC-Ⅰ)是载脂蛋白家族中分子质量最小的成员, 在脂类摄入、转运和分泌中发挥重要作用。通过cDNA文库随机测序获得了香鱼 (Plecoglossus altivelis) ApoC-Ⅰ(PaApoC-Ⅰ)全长cDNA序列。PaApoC-Ⅰ由574个核苷酸组成, 包含一个长度267 bp的开放阅读框, 编码88个氨基酸, 预测分子量为10.08 ku, N-末端1~20位氨基酸残基为信号肽序列。氨基酸序列多重比对结果表明, PaApoC-Ⅰ与虹鳟 (Oncorhynchus mykiss) ApoC-Ⅰ同源性最高, 为67.0%; 系统进化树分析表明, 哺乳动物、爬行动物、两栖类和鱼类的 ApoC-Ⅰ分别成簇, PaApoC-Ⅰ位于鱼类 ApoC-Ⅰ簇中, 且与虹鳟ApoC-Ⅰ进化相关性最高。基因组结构分析表明, PaApoC-Ⅰ基因组DNA序列由2个内含子和3个外显子组成。实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR, qRT-PCR)结果显示, PaApoC-Ⅰ mRNA表达量在香鱼肝组织中最高, 镉胁迫后在肝、脾、肾和肠中显著上调, 在鳃中表达量显著下调。综上, PaApoC-Ⅰ的表达与镉胁迫密切相关, 可能作为水环境中重金属镉污染的生物分子标记。研究结果为进一步研究鱼类ApoC-Ⅰ的功能及其在重金属胁迫中的作用机制提供了基础资料。
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    三角帆蚌KSPI cDNA的分子特征及表达分析
    徐龙威,王芹,汪桂玲,李家乐
    2016 (4):  10. 
    摘要 ( 244 )   PDF  
    Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子(KSPI)在生物体的免疫应答过程中发挥着重要作用,但在三角帆蚌中尚未进行其相关研究与报道,为研究KSPI对三角帆蚌免疫过程的影响,采用RACE法克隆了三角帆蚌KSPI cDNA全序列(登录号:KT901291),获得了1029 bp的全长,其中包含5′ 、3′端非翻译区分别为61 bp、206 bp,开放阅读框762 bp,共编码氨基酸253个,分子质量为27 397.5 u,氨基酸序列包含5个Kazal结构域,与一些已知物种的KSPI编码的氨基酸序列进行同源性分析后发现,与各种物种间具有相似的结构域,属于典型的KSPI。实时荧光定量PCR分析结果表明KSPI在外套膜、血液、肝、腮、闭壳肌、性腺、斧足7个组织中均存在一定的表达量,表达量最高的是外套膜,表达量最低的是肝脏。利用嗜水气单胞菌诱导后检测发现,各个组织呈现出先升高再降低的趋势,在12或24 h达到最大值,之后开始逐渐下降并趋于稳定,推测出KSPI对三角帆蚌的免疫反应发挥重要作用。
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    小鼠节律基因clock, bmal1 3′UTR重组质粒构建与应用
    王艳利,吕柯, 陈海龙,冀国华,王婷梅,张永亮
    2016 (4):  15. 
    摘要 ( 221 )   PDF  
    为探讨miRNA与节律基因的相互作用,首先通过NCBI查找小鼠节律基因clock, bmal1 3′UTR序列,PCR扩增节律基因clock, bmal1 3′UTR全长后将目的片段定向克隆到PGL3-promoter质粒上并测序验证,构建节律基因clock,bmal1 3′UTR重组质粒。然后通过TargetScan软件预测可能与clock, bmal1 3′UTR相互作用的miRNAs,利用脂质体将miRNA模拟物与重组质粒共转293T细胞进行荧光活性检测,初步分析可能调控clock, bmal1表达的miRNAs。结果显示,采用RVP4引物进行的重组质粒反向测序结果与NCBI上查找的序列反向互补,成功构建小鼠节律基因clock, bmal1 3′UTR重组质粒,为进一步研究节律基因转录后调控机制奠定基础。miR-199a-5p(P<0.05)与miR-142-3p (P<0.01)下调重组质粒活性约33%和45%,初步证实miR-199a-5p能够与clock 3′UTR,miR-142-3p能够与bmal1 3′UTR作用调控基因转录活性。
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    阿维链霉菌来源EndoH在枯草芽孢杆菌中的表达及应用
    梁 标,郭 佳,关 锋
    2016 (4):  20. 
    摘要 ( 441 )   PDF  
    内切β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶H(EndoH)是一类识别并切割与糖肽和糖蛋白的天冬氨酸残基连接的寡聚糖上N-乙酰氨基壳糖核心的糖苷酶,可用于糖组学中大规模糖基化位点的鉴定。克隆阿维链霉菌来源的endoH,成功构建pMA0911.1-EndoH重组质粒,并转化到枯草芽孢杆菌WB600中。发酵液经疏水层析和离子交换层析等技术手段得到目的蛋白EndoH。通过重组EndoH高效率酶切RNaseB及对鸡卵清标准糖蛋白(OVA)的N-糖链结构的鉴定,表明重组EndoH在糖组学N-糖链结构研究中具有良好的应用前景。
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    高温耐碱性果胶酶菌株的筛选及其产酶的分离纯化研究
    谭秀华
    2016 (4):  25. 
    摘要 ( 213 )   PDF  
    从环境土壤中筛选到一株酶活较高、高温耐碱性的果胶酶菌株AP-1并对其产酶性质和分离纯化做了初步研究。酶活性质研究结果表明:该酶最适温度为70℃,最适pH 7.5。稳定性实验表明:该酶具有较好的耐碱性,同等条件下Mg2+对该酶具有显著的激活作用。分离纯化实验表明:硫酸铵盐析法中80%饱和度的硫酸铵溶液的纯化倍数最高达到了2.20倍;有机溶剂沉淀法中乙醇(2∶ 1)的纯化效果最好达到了5.20倍。
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    野生与人工养殖虎斑乌贼墨的生化组分分析与比较
    江茂旺, 蒋霞敏, 高晓兰, 王鹏帅, 阮 鹏, 韩庆喜
    2016 (4):  29. 
    摘要 ( 267 )   PDF  
    对野生与人工养殖虎斑乌贼墨的营养成分进行分析比较,旨在为其开发利用提供理论依据。采用国家标准方法测定其水分、灰分、粗蛋白、粗脂肪、多糖、氨基酸、脂肪酸、矿物质元素的含量。结果表明:野生与人工养殖虎斑乌贼墨中的水分含量差异不显著(P>0.05),其他基本营养成分含量(鲜样基础)均差异显著(P<0.05)。富含多糖,且野生乌贼墨(3.25%)< 养殖乌贼墨(3.98%)。两种墨中均含有7种必需氨基酸、10种非必需氨基酸及9种药用氨基酸,野生乌贼墨必需氨基酸(3.72%)> 养殖乌贼墨(3.22%);野生乌贼墨药用氨基酸(5.86%)< 养殖乌贼墨(6.23%),分别占氨基酸总量的56.78%、64.41%。两种墨均仅含5种脂肪酸,不饱和脂肪酸含量差异显著(P<0.05),野生乌贼墨不饱和脂肪酸(41.46%) > 养殖乌贼墨(29.18%)。在测定的4种常量元素(K、Na、Ca和Mg)及7种微量元素(Zn、Cu、Fe、Mn、Sr、Al和As)中,除Mg、Mn和Al外,其他8种元素差异显著(P<0.05)。其中微量元素(Zn)含量较高,且养殖墨(5.40±0.71)mg/g>野生墨(3.89±0.19)mg/g。综上所述,人工养殖虎斑乌贼墨富含营养价值和药用、保健功能,具有良好的开发前景。
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    在淡水和海水环境下虹鳟血液理化指标、肌肉和肝脏的抗氧化酶活性的比较
    巩建华, 郭春阳, 田 喆, 徐善良
    2016 (4):  34. 
    摘要 ( 220 )   PDF  
    采用贝克曼电解质分析仪和日立H-7600全自动生化分析仪,对不同环境下虹鳟血液理化指标、肌肉和肝脏抗氧化酶活性进行比较。结果表明: 1) 海、淡水环境下,虹鳟血清中谷丙转氨酶(GPT)含量差异显著(P<0.05),谷草转氨酶(GOT)含量差异也显著(P<0.05),淡水组均大于海水组,其值是分别是(7.00±2.82)μ/L、(44.00±7.43)μ/L,分别是海水组的1.36倍和3.35倍。2) 微量元素钾(K+)、钠(Na+)、氯(Cl-)、钙(Ca2+)和白蛋白(A)、甘油三酯以及球蛋白(G)含量,海水组大于淡水组;总胆固醇含量差异显著(P<0.05),海水组大于淡水组。3)海水组血红蛋白含量、血小板压积、红细胞数目、血小板数目均大于淡水组,其值分别降低了68.31%、37.32%、22.58%、24.29%;血小板分布宽度、红细胞分布宽度、红细胞压积差异显著(P<0.05)。
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    腹毛目纤毛虫颗粒尖毛虫射出胞器的研究
    唐文君, 范鑫鹏, 倪兵, 顾福康
    2016 (4):  38. 
    摘要 ( 227 )   PDF  
    超微结构观察显示,腹毛类纤毛虫颗粒尖毛虫(Oxytricha granulifera)的整个背腹皮层表膜下分布大量的长椭圆形射出胞器。胞器发育成熟后,在泡后部充满不同电子密度的纤维物质,在泡前端形成凹陷小窝。成熟射出胞器前端紧贴表膜,以纵向、斜向或弧形的列位于表膜下。胞器射出时,前端的膜与细胞质膜融合,射出内容物后,射出物常留在细胞表面。联系胞器射出后射出物常黏附在细胞表面,且其形态与成熟射出胞器无明显差异的现象,推测胞器射出时射出物可能经历了通过表膜向细胞外缓慢逸出的过程,因此,该射出胞器可能是一类分泌型射出胞器。此外,颗粒尖毛虫的射出胞器可被阿尔新蓝溶液标记,由于该溶液可以快速地标记粘蛋白(mucin)及羧基化或硫酸化的粘液物质,因此认为,颗粒尖毛虫射出胞器可能含此类粘液物质;在甲基绿-派洛宁的刺激下,颗粒尖毛虫的射出胞器大量射出,射出物黏附聚集形成“壳”,将纤毛虫包裹在内,据此认为,这可能是细胞在不利环境条件下形成的一种防御机制。
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    四指马鲅头肾和脾脏组织学研究
    罗俊标,谢木娇,区又君,温久福,李加儿,王鹏飞
    2016 (4):  43. 
    摘要 ( 285 )   PDF  
    采用常规石蜡组织切片和HE染色方法研究四指马鲅(Eleutheronema tetradactylum)头肾和脾脏的组织结构。结果显示:头肾位于背部脊椎左右两侧,呈深褐色,实质柔软而表面粗糙。组织学结构特征:最外层为胶原纤维,实质无肾单位而由大量淋巴细胞、血细胞、粒细胞和巨噬细胞填充,黑色素-巨噬细胞中心(melano-macrophage centers,MC)不明显。脾脏衬贴于胃部后端与肠弯曲交界处的系膜内,棕色,体积较大,呈“三角形”;组织最外层有被膜,并形成明显的脾小梁结构,实质由红髓和白髓组成,红髓占实质大部分,分布密集由血细胞连接成脾索,内部含丰富的脾血窦,MC密集分布;白髓由大量淋巴细胞填充,中央有动脉血管穿过。结论表明四指马鲅头肾和脾脏是典型的造血、免疫器官。
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    草铵膦对四膜虫毒性作用的研究
    董姗姗,王 伟,耿 明,王占军,徐忠东
    2016 (4):  48. 
    摘要 ( 228 )   PDF  
    从细胞增殖和DNA损伤角度研究不同浓度的草铵膦对嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)的毒性作用。采用12 h间隔细胞计数绘制96 h生长曲线,单细胞凝胶电泳技术检测受试四膜虫的尾长(TL)、尾矩(TM)及Olive尾矩(OTM)。生长曲线绘制实验表明:草铵膦处理组与空白组种群细胞数目差异显著(P<0.01)。单细胞凝胶电泳实验表明:染毒各组的细胞TL、TM、OTM与对照组相比,均有显著增大(P<0.01),DNA损伤级别随着染毒浓度增大而升高(P<0.01)。实验浓度的草铵膦对细胞DNA均造成了不同程度的损伤,反映了其对四膜虫具有急性遗传毒性
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    陕西子午岭国家级自然保护区湿地鸟类群落特征
    徐世才,沈雪健,王 莉,席 秀,白剑波
    2016 (4):  52. 
    摘要 ( 206 )   PDF  
    2014年3月至2015年2月用样线法结合样点法对子午岭自然保护区内湿地鸟类进行调查记录,并对该地区鸟类群落的组成、结构以及季节变化进行分析研究。调查共记录鸟类15目27科42种,其中以雀形目为主,共18种1590只,占被调查鸟类总数的47.98%。夏季鸟类群落的种数(33)、个体数(1245)、Shannon-Wiener指数(4.94027)、均匀度(0.97936)都为全年最高,优势度指数(0.03187)为全年最低。全年有树麻雀(Passer montanus)、环颈雉(Phasianus colchicus)、喜鹊(Pica pica)、灰喜鹊(Cyanopica cyana)、大山雀(Parus major)、戴胜(Upupa epops)6种优势种,且四季都有分布。Sorenson相似性系数显示鸟类种类转化率最低为夏季-秋季鸟类群落,最高为秋季-冬季鸟类群落。总体来看,子午岭自然保护区的鸟类群落稳定性强。
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    不同胎仔数对大绒鼠(Eothenomys miletus)持续能量摄入的影响
    朱万龙, 杨 涛, 付家豪, 王政昆, 蔡金红
    2016 (4):  56. 
    摘要 ( 277 )   PDF  
    哺乳动物的母体往往会在哺乳期达到持续能量摄入和代谢率比值(sustained energy intake/ metabolic rate, SusEI/MR)的上限。不同的动物其上限值不同。研究了大绒鼠在不同胎仔数条件下(少胎仔数组、对照组和多胎仔数组)其能量代谢的变化。结果表明:3组动物从哺乳期开始到结束都降低了体重,增加了食物摄入。少胎仔数组的食物摄入低于对照组和多胎仔数组。多胎仔数组的胎仔数在哺乳期中显著降低,断奶时胎仔数和对照组差异不显著。少胎仔数组总胎仔重显著低于对照组和多胎仔数组,而平均胎仔重要高于其它两组。3组动物的静止代谢率差异不显著,MP组、Con组和PP组的EI/RMR分别为3.56、3.36和3.64。以上结果表明大绒鼠在不同胎仔数条件下其最大摄入量在12 g/day,SusEI/MR比值维持在3.6倍。
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    派河流域生活垃圾简易处置场污染特征与治理
    白玉方,吴 克,吴东彪,陈 俊,宋早明,孟利利
    2016 (4):  60. 
    摘要 ( 251 )   PDF  
    通过调查采样和实验分析,研究派河流域生活垃圾简易处置场的污染状况,并提出合理性的治理措施。派河流域简易处置场渗滤液TP、TN、TOC、CODCr和重金属含量均超过GB16889—2008中规定的限值。简易处置场周围地表水TP、TN、TOC、CODCr的含量,除Z镇TN外,均超过GB3838—2002中Ⅳ类标准规定的限值。除Hg外,简易处置场中生活垃圾与其周围土壤、地表水重金属含量均符合GB15618—1995二级标准或GB3838—2002中Ⅳ类标准规定的限值,地表水Hg含量超标倍数最高,为29倍左右。派河流域简易填埋场生活垃圾腐化程度较高,距离卫生填埋场较远,适合采用表面覆盖防渗膜与四周帷幕灌浆的就地封场治理方式。简易堆场位于农田中,对周围农作物污染较大,腐化程度相对较低,适合采用异地卫生填埋的治理方式。
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    综述与专论
    木质纤维素降解白腐菌的蛋白质组学研究进展
    王凤娟,李伟庆,牟志美,王彦文,刘庆信,高绘菊
    2016 (4):  65. 
    摘要 ( 229 )   PDF  
    木质纤维素是生物能源领域颇具潜力的原料,其复杂的结构组成是制约高效降解利用这一资源发展生物炼制的瓶颈。白腐菌作为自然界最主要的木质纤维素降解菌之一,揭示其降解的分子机制是阐明自然界木质纤维素降解过程和该生物质资源得以高效利用的基础。近年来,蛋白质组学技术在木质纤维素生物降解菌方面的研究取得许多成果,为深入研究木质纤维素的生物降解机理提供了重要信息。从木质纤维素降解白腐菌的胞内蛋白质组学、亚蛋白质组学和分泌蛋白质组学,以及木质纤维素降解过程降解酶之间的相互作用等方面综述了近年来的研究进展,以期从蛋白质组学角度阐明木质纤维素生物降解的分子机制。
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    表观遗传学调控Th细胞分化发育的研究进展
    淮文英, 杨福权, 唐玉琴, 张天娥, 刘伟伟
    2016 (4):  70. 
    摘要 ( 317 )   PDF  
    CD4+辅助性 T细胞(Th细胞)在抗原刺激与机体微环境调控下分化发育为不同的细胞亚群以对抗或适应外界环境改变,而分化过程受控于由细胞因子和转录因子所组成的复杂调控网络。表观遗传学是研究不涉及DNA序列变化的DNA甲基化谱、染色质结构状态等对基因表达的改变,并在亲代与子代之间传递的一门科学。表观遗传对免疫细胞的分化调控和Th细胞亚群可遗传性等方面具有重要影响。
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    儿茶素基于淀粉样蛋白级联假说的阿尔茨海默病
    刘彦霞, 劳凤学, 杨泽锋, 张意
    2016 (4):  73. 
    摘要 ( 304 )   PDF  
    阿尔茨海默病(AD)是一种与年龄相关的神经退行性疾病,至今其发病机制尚未明确,但淀粉样蛋白级联假说在AD发病机制研究中占据主导地位,该假说认为β-淀粉样蛋白(Aβ)过度产生、聚集沉淀是阿尔茨海默病发病的主要原因。儿茶素类物质是一类常见的植物活性成分, 在AD病的防治研究中具有重要意义。对儿茶素类物质基于淀粉样蛋白级联假说对AD的防治作用及其机制进行综述,并对其在应用中存在的问题进行分析,以期为儿茶素类物质在阿尔茨海默病中的深入研究及应用提供参考。
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    植物生殖发育分子机理简述
    尹伟平, 刘 闯, 潘美昕, 狄贵秋, 申哲, 刘雪梅
    2016 (4):  78. 
    摘要 ( 317 )   PDF  

    植物的生活周期包括两部分:营养生长和生殖生长。其中植物生殖发育又包括三个阶段:花的发育,配子体的形成与发育,传粉受精与合子的形成。从在环境中生存的角度和整体植物学发育的进程来看,种子的发育也属于植物的生殖发育。植物发育的不同阶段有不同的基因调控网络和分子调控机理,从生殖发育各个阶段的角度出发综述了相关基因的调控机理。

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    茶多酚对猪繁殖性能的影响及其作用机理
    吴晓敏,冯 涛,白佳桦,许晓玲,黄 正, 韩向敏,刘 彦
    2016 (4):  83. 
    摘要 ( 325 )   PDF  
    茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称,是一种绿色、新型、高效的抗氧化剂。茶多酚因化学结构特殊使其具有独特的生物学功效而得到广泛应用,近年来,在畜禽健康高效养殖中也发挥着重要作用。就茶多酚对猪繁殖性能方面的影响及其作用机理进行简要阐述。
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    银鲳的人工繁育研究进展
    胡佳宝, 乐琪君, 杜丽红, 郑华坤, 徐小双, 徐善良, 王亚军
    2016 (4):  87. 
    摘要 ( 386 )   PDF  
    银鲳作为一种重要的海洋经济鱼类,随着人类采捕及环境的变化,野生资源的不断减少。在银鲳生物学特性的研究基础上,开展人工养殖、育种将是未来研究工作的重点内容。银鲳繁殖期一般在每年4月—6月,产卵场主要位于水深10~20 m,盐度26‰~31‰的河流入海口及近海养料、浮游生物丰富的海域;银鲳性腺发育分成I~VI期,因海域温度、光照等条件不同造成性腺发育时期不同。目前,养殖银鲳在性腺发育与野生个体存在较大差异,并且在繁殖季一般饲料不足以提供足够营养,因此应添加桡足类、水母类等作为配合饵料喂养;气泡病、白点病、细菌病等病害对银鲳造成的死亡率极高,因此在人工养殖过程中,应以预防为主,防治结合。基于目前国内外银鲳野生及人工繁育方面的研究,比较了野生和养殖银鲳的性腺、胚胎发育特点,总结了人工亲鱼培育、养殖环境控制、饲料配置等方面的研究结果;针对目前人工养殖环节中存在的问题提出了建议,并对未来银鲳的养殖品质提升、营养饲料、优良种质筛选提出了展望。
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    陆生野生动物保护:生境破坏与机制响应
    于莉莉,汪 浩,沈文星
    2016 (4):  92. 
    摘要 ( 240 )   PDF  
    陆生野生动物资源保护是生物多样性保护的一个重要内容。在分析陆生野生动物资源与生物多样性关系基础上,从陆生野生动物生存的湿地、森林和草地生境角度,分析生境破坏的原因。研究发现农林牧业生产、工业化进程和过度消费是生境破坏的主要原因。结合实际情况,就如何改善陆生野生动物生境,提出生境法律保护、综合管理和引导合理消费的对策措施。
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    代谢网络流分析方法概述
    庞 建,刘占英,郝 敏
    2016 (4):  97. 
    摘要 ( 657 )   PDF  
    生物体代谢网络模型是系统生物学的重要研究内容之一,代谢网络流分析方法在代谢网络分析中具有重要意义。了解代谢网络流量分析方法有助于理解代谢网络结构和功能的关系,代谢流量与基因表达的关系,在分析疾病,识别药物靶标,制药工程和基因改造方面具有重要现实意义。综述了几种常用代谢网络流分析方法:流平衡分析(FBA)、代谢调节最小化分析(MOMA)、调节开关最小化分析(ROOM)、含有二次线性规划的动态流平衡分析方法(DFBA-LQR)、流量范围分析(FVA)、双层规划策略识别基因敲除(OptKnock)、基因表达上调下调(OptReg)和重新设计生产系统的计算框架(OptStrain)等,以期为代谢网络流分析提供参考,并进一步为实验研究提供指导。
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    技术方法
    小G蛋白RhoA活性检测方法的优化
    曾 婷,崔照盟,蒋 维,李增霞,党永军, 余 龙
    2016 (4):  103. 
    摘要 ( 1131 )   PDF  
    Rho蛋白家族的小G蛋白是调节细胞迁移的关键蛋白,具有GTP酶活性。RhoA是该蛋白家族的重要成员,通过其催化活性来调节肌动蛋白的聚集和收缩,在肿瘤迁移和侵袭中发挥重要作用。所以,RhoA的GTP酶活性检测对于研究细胞迁移的机制,以及靶向RhoA的治疗策略具有重要意义。RhoA下游效应子Rhotekin基因(RhoA effector)具有RhoA结合结构域(RhoA binding domain, RBD),该RBD蛋白结构域能与活化状态的GTP-RhoA特异结合。通常用外源表达的RBD蛋白pulldown结合GTP-RhoA的蛋白量,作为RhoA活性检测方法。但是,哺乳动物来源的RBD蛋白在原核细胞中的表达量很低,使得pulldown结合GTP-RhoA蛋白量的效率低下,从而不利于RhoA的活性检测。因此,目的在于提高RBD蛋白在大肠杆菌中的产量,提高RBD蛋白pulldown结合GTP-RhoA的效率,从而优化RhoA活性检测方法。通过密码子优化技术对RBD基因进行改良,提高其蛋白在大肠杆菌中的表达量,优化RBD蛋白pulldown实验检测GTP-RhoA的效率。优化后的RBD与GST标签蛋白融合后在大肠杆菌中高效表达,并且能够特异性地与GTP-RhoA结合。成功地构建了具有较高表达水平的GST-RBD载体,并优化了传统的GST-RBD pulldown检测体系,为进一步深入研究RhoA在细胞迁移中的功能提供了一种有效的技术手段。
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    人脐带血血红蛋白的纯化
    陈 晨,王 培,齐东来,王 翔
    2016 (4):  107. 
    摘要 ( 292 )   PDF  
    为了探索人脐带血血红蛋白的纯化方法,用0.9%生理盐水洗涤脐带血,经蒸馏水进行粗提,经Q300阴离子交换纯化血红蛋白,对纯化后的血红蛋白进行浓缩,得到终产品。测定血红蛋白浓度及高铁血红蛋白含量,并用SDS-PAGE和HPLC进行纯度分析,通过血样分析仪进行氧饱和曲线分析。纯化和浓缩后血红蛋白浓度为11.5 g/dl,高铁血红蛋白含量≤1%;经SDS-PAGE和HPLC分析血红蛋白纯度较高,不含杂蛋白,凝胶成像系统分析纯度为99.10%±0.70%;纯化前后血红蛋白的氧合曲线无明显偏移,不影响其载氧活性。研究证明,成功地得到了人脐带血血红蛋白纯化的方法。
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    月桂酸淀粉酯在\[BMIM\]BF4离子液体中的酶法合成
    袁久刚, 向中林, 范雪荣, 王 强, 姚金龙, 唐文君, 于拥军
    2016 (4):  110. 
    摘要 ( 243 )   PDF  
    为了改善淀粉的疏水性能,采用固定化脂肪酶CALB在\[BMIM\]BF4离子液体中对淀粉进行了月桂酸酯化改性。首先,对反应后得到的产物结构进行了核磁分析,结果显示月桂酸在脂肪酶的催化作用下成功对淀粉进行了改性。其次,研究了不同因素对产物取代度的影响,结果表明月桂酸淀粉酯的较优制备条件为:脂肪酶用量0.2 g、月桂酸/AGU摩尔比=3∶ 1、反应温度60℃、反应时间4 h。最后,对月桂酸接枝后淀粉的疏水性能进行了测试,结果显示淀粉的润湿接触角明显提高,而且随着取代度的增加,疏水性也越高。
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    教学研究
    兽医临床诊断学实验教学方法的改革与创新
    王希春, 李 玉, 冯士彬, 李锦春, 吴金节
    2016 (4):  114. 
    摘要 ( 271 )   PDF  
    兽医临床诊断学是兽医专业必修的一门专业基础课,它不仅包含丰富的理论知识,也涉及多项实验技能,在兽医专业人才培养中占有十分重要的地位。针对传统实验教学中存在的问题和不足,从平台建设、教学计划、诊断技术及考核机制等方面进行改革,积极探索适合兽医专业发展新思路,提高了学生的积极性和主动性,取得了良好的效果,同时也为其他实验课程教学方法的改革提供了参考。
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    伴性基因遗传平衡中的通式及其在教学中的应用
    丁建华, 张海军
    2016 (4):  118. 
    摘要 ( 345 )   PDF  
    Hardy-Weinberg定律为群体遗传学的理论基石之一,它不仅适用于常染色体上的基因平衡问题,也适用于性连锁基因。常染色体上的一对等位基因的平衡问题由于不涉及性别,其平衡特点较为简单,容易被理解,而伴性基因则不然。对伴性基因的遗传平衡特点进行了详细的阐述,并给出了伴性基因遗传平衡中的2个通式。在教学过程中,结合这2个通式,利用Excel软件的公式输入与作图功能,即可生动地展示伴性基因遗传平衡中的振荡过程,从而取得良好的教学效果。
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    高校植物学创新实践教学体系的构建与实践
    张秀玲, 符爱云, 李 妍, 王丽燕, 戴忠民
    2016 (4):  122. 
    摘要 ( 196 )   PDF  
    实践教学是植物学教学的重要组成部分。以生物科学专业人才培养目标为依据,对实践教学内容进行优化,对实践教学方法和手段进行改革, 对实践教学的设施和条件进行改善。实验室实行开放运行机制,构建了新型植物学实践教学体系,培养了学生的创新能力。在实践的基础上,对植物学实践教学的设计进行了探讨,以期为植物学实践教学改革提供借鉴。
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    医学微生物学实验教改及其考核制度的构建
    杨 成, 刘 辉
    2016 (4):  125. 
    摘要 ( 209 )   PDF  
    医学微生物学实验作为医学微生物学的重要组成部分,它注重培养训练学生实践能力、解决问题的能力,因而,结合临床需要,以提高学生实践综合能力为目标,对实验教学进行改革。同时构建相应的考核制度对教改效果进行评价,以求提高和改善医学微生物实验教学质量。结果表明:改革提高了学生实践能力,锻炼了学生科研能力;考核系统能反映学生的实践能力和综合能力。
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    利用网络资源优化医学生物化学教学
    罗玥佶, 曾杰, 李妍, 朱传炳
    2016 (4):  127. 
    摘要 ( 202 )   PDF  
    利用网络资源优化传统教学的教学模式是以教师为引导,提高学生学习兴趣,变传统的被动学习为主动学习,可提高学生综合素质的一种教学模式。依托湖南省级精品课程的建设,以网络资源优化的教学模式代替传统教学模式,主要为网络课程、微课、讨论式教学、QQ及微信交流等,最后通过期末考试成绩和问卷调查两种方式分析教学效果。结果表明: 网络资源优化的教学模式能有效地提高学生的学习成绩,激发学生的学习兴趣,促进对知识点的掌握,培养了学生的信息素养、自主学习和创新能力,取得了较好的效果,进一步完善后可在相关课程教学中推广应用。
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