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香鱼ApoC-Ⅰ的克隆、序列分析及其镉胁迫下的表达
陈亚萍, 丁斐斐, 李长红, 默立宾, 陈 炯
2016 (4):
5.
载脂蛋白C-Ⅰ (Apolipoprotein C, ApoC-Ⅰ)是载脂蛋白家族中分子质量最小的成员, 在脂类摄入、转运和分泌中发挥重要作用。通过cDNA文库随机测序获得了香鱼 (Plecoglossus altivelis) ApoC-Ⅰ(PaApoC-Ⅰ)全长cDNA序列。PaApoC-Ⅰ由574个核苷酸组成, 包含一个长度267 bp的开放阅读框, 编码88个氨基酸, 预测分子量为10.08 ku, N-末端1~20位氨基酸残基为信号肽序列。氨基酸序列多重比对结果表明, PaApoC-Ⅰ与虹鳟 (Oncorhynchus mykiss) ApoC-Ⅰ同源性最高, 为67.0%; 系统进化树分析表明, 哺乳动物、爬行动物、两栖类和鱼类的 ApoC-Ⅰ分别成簇, PaApoC-Ⅰ位于鱼类 ApoC-Ⅰ簇中, 且与虹鳟ApoC-Ⅰ进化相关性最高。基因组结构分析表明, PaApoC-Ⅰ基因组DNA序列由2个内含子和3个外显子组成。实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR, qRT-PCR)结果显示, PaApoC-Ⅰ mRNA表达量在香鱼肝组织中最高, 镉胁迫后在肝、脾、肾和肠中显著上调, 在鳃中表达量显著下调。综上, PaApoC-Ⅰ的表达与镉胁迫密切相关, 可能作为水环境中重金属镉污染的生物分子标记。研究结果为进一步研究鱼类ApoC-Ⅰ的功能及其在重金属胁迫中的作用机制提供了基础资料。
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