三角帆蚌KSPI cDNA的分子特征及表达分析
- 1.上海海洋大学 农业部淡水水产种质资源重点实验室，上海 201306；
2. 上海市水产养殖工程技术研究中心，上海 201306
Molecular characteristics and expression analysis of Kazal-type serines proteinase inhibitor (KSPI )gene from Hyriopsis cumingii
- 1.Shanghai Ocean University, Aquaculture Division, E-Institute of Shanghai Universities, Shanghai 201306;
2. Shanghai Engineering Research Center of Aquaculture, Shanghai 201306, China
摘要： Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子(KSPI)在生物体的免疫应答过程中发挥着重要作用，但在三角帆蚌中尚未进行其相关研究与报道，为研究KSPI对三角帆蚌免疫过程的影响，采用RACE法克隆了三角帆蚌KSPI cDNA全序列(登录号：KT901291)，获得了1029 bp的全长，其中包含5′ 、3′端非翻译区分别为61 bp、206 bp，开放阅读框762 bp，共编码氨基酸253个，分子质量为27 397.5 u，氨基酸序列包含5个Kazal结构域，与一些已知物种的KSPI编码的氨基酸序列进行同源性分析后发现，与各种物种间具有相似的结构域，属于典型的KSPI。实时荧光定量PCR分析结果表明KSPI在外套膜、血液、肝、腮、闭壳肌、性腺、斧足7个组织中均存在一定的表达量，表达量最高的是外套膜，表达量最低的是肝脏。利用嗜水气单胞菌诱导后检测发现，各个组织呈现出先升高再降低的趋势，在12或24 h达到最大值，之后开始逐渐下降并趋于稳定，推测出KSPI对三角帆蚌的免疫反应发挥重要作用。