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当期目次

    2023年, 第40卷, 第2期 刊出日期:2023-04-18 上一期    下一期
    特约综述
    盘状结构域受体1(DDR1):实体肿瘤治疗的新靶点
    舒 航, 金腾川, 王 华
    2023 (2):  1.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.001
    摘要 ( 316 )   PDF  
    盘状结构域受体家族(discoidin domain receptors, DDRs)成员DDR1广泛表达于人体正常组织,与肿瘤的发生发展密切相关,基于DDR1本身的结构和生物学特点,围绕DDR1在肿瘤研究的进展展开综述,阐述DDR1对肿瘤细胞的增殖生存、迁移侵袭、上皮间质转化和细胞代谢的影响,以及DDR1对肿瘤微环境的重要作用,同时分析以DDR1为靶点的抗肿瘤药物的研究进展,以期为DDR1作为实体肿瘤治疗的新靶点提供理论依据和临床参考。
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    研究报告
    SREBP1c-ACCα/FAS和SREBP1c-FABP3轴向调控HepG2胞内脂质合成与转运
    付常振, 郑 颖, 路 遥, 王仁军, 刘庆平
    2023 (2):  9.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.009
    摘要 ( 371 )   PDF  
    SREBP1c是长链脂肪酸(LCFAs)从头合成及胞内转运的关键调控因子,探讨SREBP1c-ACCα/FAS和SREBP1c-FABPs轴向调控LCFAs合成与转运紊乱诱发NAFLD的分子机制。制备介导SREBP1c过表达腺病毒Ad-SREBP1c,侵染HepG2细胞后酶法测定胞内TG含量,RT-PCR及Western Blot法检测ACCα、FAS、FABP3和FABP4的表达量。结果显示:Ad-SREBP1c病毒滴度为1.6×109GFU/mL;侵染HepG2细胞24 h后介导SREBP1c mRNA及蛋白的表达量分别升高89.73倍和7.27倍(P<0.01),促进下游LCFAs合成基因ACCα和FAS分别升高1.55倍和3.42倍(P<0.01),蛋白表达量分别升高1.23倍(P<0.05)和1.43倍(P<0.01);FABP3 mRNA和蛋白表达量分别升高4.03和2.06倍(P<0.01),FABP4无显著变化;Ad-SREBP1c侵染HepG2细胞24 h和48 h胞内TG含量分别升高1.24倍(P<0.05)和2.41倍(P<0.01);SREBP1c-ACCα/FAS轴向调控LCFAs从头合成及SREBP1c-FABP3轴向介导胞内转运,可能是促使胞脂异位沉积导致NAFLD发生的关键机制之一。
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    模拟微重力条件下NRF2调节节律基因振荡作用
    黄 超, 陈海龙, 王春艳, 冀国华, 吕 柯, 元艳宏, 宋 波, 曲丽娜
    2023 (2):  14.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.014
    摘要 ( 126 )   PDF  
    探讨模拟微重力效应是否通过NRF2影响CLOCK和BMAL1表达节律振荡,使用细胞回转器模拟微重力效应,结果表明:模拟微重力效应使抗氧化转录因子NRF2表达水平显著降低,细胞内ROS水平显著增加;CLOCK和BMAL1表达显著降低,振荡节律减弱,周期缩短,相位改变,当过表达NRF2后可逆转微重力效应引起的节律变化,增强CLOCK和BMAL1的表达节律;提示模拟微重力效应可能通过NRF2调节CLOCK和BMAL1的表达振荡。
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    人源SOD1及其突变体的表达纯化及酶学性质
    杨方瑶, 简甜甜, 蒋立翔, 张 钰, 黄新河
    2023 (2):  20.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.020
    摘要 ( 164 )   PDF  
    分析人源SOD1(hSOD1)、牦牛SOD1序列,定点突变得到hSOD1突变体Mt1SOD1(E25G、P29T、E101V、C112S)和Mt2SOD1(I18T、N20H、K31V、C112S),全合成经密码子优化的hSOD1、Mt1SOD1、Mt2SOD1、牦牛SOD1序列后,将其重组克隆到表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得重组菌。重组菌经1 mmol/L IPTG诱导,在含800 μmol/L Cu2+和20 μmol/L Zn2+的LB培养基中,25 ℃、180 r/min诱导培养16 h,4种SOD1均以可溶性形式高效表达,镍亲和层析可有效纯化重组SOD1。100 mL LB 摇瓶培养获得的hSOD1 活性为71094 U/mg,产率为4.57 mg。Mt1SOD1活性为128506 U/mg,产率为3.13 mg。Mt2SOD1活性为58700.1 U/mg,产率为5.47 mg。牦牛SOD1活性为42969.5 U/mg,产率为6.81 mg。对hSOD1、Mt1SOD1的酶学性质研究表明,在25 ℃~55 ℃,酶活力基本保持不变,75 ℃保温30 min,hSOD1相对酶活力保持在50%左右,Mt1SOD1保持30%酶活性。在pH 3.6~10.4条件下放置30 min,两种SOD1均能保持70%以上的酶活力。研究通过定点突变获得高活性高稳定性的hSOD1和Mt1SOD1,为SOD1在医疗、保健、化妆品等领域的应用奠定基础。
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    疏水类弹性蛋白多肽的克隆表达及相变特性分析
    王珊珊, 刘 阳, 高 琪, 王 令, 路宏朝, 张 涛
    2023 (2):  27.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.027
    摘要 ( 135 )   PDF  
    类弹性蛋白多肽(elastin-like polypeptides,ELPs)作为新型温敏生物材料,在药物递送、组织工程和蛋白质分离纯化领域具有广阔的应用前景,精确控制快速生物合成具有特定相变特性的ELPs至关重要。利用质粒重建递归定向连接技术,成功构建以缬氨酸为客座氨基酸的重组质粒pET28-ELP25、pET28-ELP50和pET28-ELP100,分别转化至Escherichia coli BL21(DE3)中,经自诱导培养基的培养,SDS-PAGE结果表明,ELPs在大肠杆菌体系中实现了胞内可溶过量表达,表达量约占胞内全细胞蛋白的30%以上。利用可逆相变循环法(inverse transition cycling,ITC)进行分离纯化,仅需3轮ITC获得电泳纯ELP25、ELP50和ELP100。热比浊法测定相变温度,分析显示ELPs的相变温度与多肽浓度、离子强度和多肽分子量均呈负相关,为进一步重组克隆表达特定相变特性的温敏多肽生物材料奠定理论基础。
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    栓菌4281漆酶催化几种不同结构染料脱色
    李 丽, 张学成, 肖亚中
    2023 (2):  33.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.033
    摘要 ( 134 )   PDF  
    栓菌4281菌株是实验室自主筛选鉴定的新型漆酶高效生产菌株,为探究其漆酶对染料脱色的作用效果,利用栓菌4281漆酶粗酶液对偶氮、蒽醌和苯甲烷类3种类型的染料进行脱色反应,分别考察不同介体类型、温度、pH值、介体浓度、给酶量、反应时间以及金属离子对染料脱色的影响。结果表明:添加介体对染料脱色效率有显著的促进作用,6种染料在8 h内基本反应完全,在各染料最适反应条件下活性蓝、茜素红、甲基橙和结晶紫的最大脱色率分别达到93.9%、92.3%、90%和90%,刚果红和碱性品红脱色率达到76.6%和75%;Mn2+和高浓度的Fe2+对栓菌4281漆酶催化染料脱色作用有一定的抑制,而在Na+、Mg2+、Cu2+、Ni2+和Zn2+金属离子存在下该漆酶仍能对染料保持较高的脱色率。研究表明:栓菌4281漆酶在染料脱色中具有较大的应用潜力;在环境废水的治理中具有良好的应用前景。
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    内蒙古岱海中细菌多样性分析
    姜 凯, 曹春玲
    2023 (2):  38.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.038
    摘要 ( 147 )   PDF  
    采用培养方法和宏基因组测序技术分析内蒙古岱海湖水及沉积物中的细菌多样性。培养方法所分离细菌分属4门,6纲,18目,25科,47属,77种,其中,潜在新菌种20种,优势门为变形菌门(Proteobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes)。培养过程中发现0.22 μm滤膜过滤处理能滤除大部分常见的细菌,提高新种检出效率。宏基因组测序共分析到细菌83个门,优势门为变形菌门和拟杆菌门(Bacteroidetes)。门水平还识别出一个未归类的细菌门和50个候选菌门,其中,33个为候选门级辐射类群(candidate phyla radiation, CPR)类群。结果表明,岱海中细菌具有较高的丰度和多样性,同时还存在丰富的CPR类群菌株。研究结果为下一步岱海微生物资源挖掘以及生态功能研究奠定基础。
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    块菌(Tuber)在六盘山的分布及其生态学意义
    邓晓娟, 刘培贵, 陈 娟, 乔 鹏, 刘建利, 肉斯塔木·艾买提, 闫兴富
    2023 (2):  45.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.045
    摘要 ( 105 )   PDF  
    2019—2020年,调查六盘山地下真菌资源,采集到块菌属(Tuber)标本12份。通过宏微观形态特征及DNA序列特征的比较分析,新采集到的块菌标本分别被鉴定为假喜马拉雅块菌(T.pseudohimalayense)、历山块菌(T.lishanense)和脐凹块菌(T.umbilicatum),其中假喜马拉雅块菌具有极高的经济价值。基于采集的标本,补充描述该3种块菌的形态学特征,对其分类地位和地理分布进行讨论,拓宽块菌在中国的地理分布区域的认识,补充块菌在该地区的标本记录及相关生态学资料。该研究首次确认六盘山分布有丰富的块菌资源,发现块菌新的重要分布区域,对完善中国块菌资源多样性、生物地理学和生态学的研究具有重要意义。
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    不同林分气生藻春季种类组成特征及其影响因素
    魏丽漫, 孙庆业, 赵 琼, 齐 力
    2023 (2):  51.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.051
    摘要 ( 116 )   PDF  
    2021年3月对安徽省宁国市枫香林(Liquidambar formosana)、青冈栎林(Cyclobalanopsis glauca)、马尾松林(Pinus massoniana)和杉木林(Cunninghamia lanceolata)土壤藻和树生藻种类组成特征进行调查,研究气生藻丰富度与环境因子的关系。结果显示:表层土壤和树皮上共检出藻类83种,隶属5门7纲21目35科45属,以绿藻、蓝藻居多。土壤藻种类丰富度明显高于树皮,22种藻类在两种基质上均存在。土壤藻优势科为绿藻门丝藻科,树皮藻优势科为蓝藻门色球藻科。土壤藻丰富度表现为青冈栎林>枫香林>杉木林>马尾松林,影响其丰富度最显著的环境因子为土壤氨态氮、有机质(P<0.05)。树皮藻丰富度表现为马尾松林>青冈栎林>杉木林>枫香林,其丰富度受表层树皮总氮、总磷、总钾影响不明显。
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    LED混合光对螺旋藻生长及藻蓝蛋白积累的影响
    谢佳文, 徐佩伦, 韩 佩, 钱 军, 张佩东, 王 邦, 郭凌玥, 周文广
    2023 (2):  58.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.058
    摘要 ( 178 )   PDF  
    为探究不同光质对螺旋藻生长及藻蓝蛋白积累的影响规律,以发光二极管(LED)为光源,在白光(W)、蓝光(B)、红光(R)单色光和白、蓝、红9种不同光强比例组合条件下培养螺旋藻,测定螺旋藻的生物量、藻蓝蛋白的含量及产量。结果表明:红光对螺旋藻的生长速度有促进作用,蓝光有利于提高螺旋藻藻蓝蛋白含量及纯度;B+R(75%+25%)组OD560比蓝光提高了154%,干重提高了157%,藻蓝蛋白含量比红光提高了43%,藻蓝蛋白纯度比红光提高了22%;B+W(75%+25%)组OD560比蓝光提高了107%,干重提高了119%,藻蓝蛋白含量、纯度与蓝光单色光接近;W+R(50%+50%)组藻蓝蛋白产量最高,为42 mg/(L·d)。
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    水稻抗倒伏和产量性状的相关性分析及QTLs定位
    韩雷锋, 周 燃, 周 涛, 林翠香, 甘 泉, 倪大虎, 石英尧, 宋丰顺
    2023 (2):  65.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.065
    摘要 ( 117 )   PDF  
    以高产品种扬稻6号和抗倒伏品种绿旱1号构建的192个重组自交系为试验材料,对8个抗倒伏性状(株高、鲜重、抗折力、基部横切面积、基部髓腔面积、基部茎壁面积、壁厚和倒伏指数)和3个产量相关性状(穗长、单穗重、有效穗数)进行相关分析和QTL定位。共定位到抗倒伏相关QTL 14个,分布在第1、2、3、5、7、8、10、12号染色体上,LOD介于3.02~14.78,加性效应值在-5.22~2.36,QTL贡献率为3.36%~20%;产量相关QTL 8个,分布在第1、3、5、12 号染色体上,LOD介于3.1~9.43,加性效应值在-12.55~4.58,QTL贡献率为3.93%~14.53%。多个产量性状和抗倒伏性状之间呈显著负相关,且定位的多个QTLs呈簇出现。研究对抗倒伏性状和产量性状进行相关性分析和QTL定位,为分子设计高产、抗倒伏的优良水稻新品种提供参考。
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    干旱胁迫下锌对马铃薯组培苗生长及生理指标的影响#br#
    党伟英, 唐 勋, 赵 婧, 赵贵宾, 朱永永, 张 宁, 司怀军
    2023 (2):  71.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.071
    摘要 ( 142 )   PDF  
    为阐明干旱胁迫下锌对马铃薯生长发育的影响,以马铃薯栽培品种‘大西洋’组培苗为试验材料,用不同锌含量(0、8.6、17.2、25.8、34.4和43 mg/L)的培养基培养15 d,再置换为含有20% PEG6000的培养基模拟干旱胁迫继续培养15 d,测定组培苗的表型、抗氧化酶活性以及渗透调节物质含量,并对抗旱性进行分析。结果发现:锌对马铃薯组培苗在PEG胁迫下的生长有显著影响,组培苗在培养基锌含量为17.2 mg/L时均表现最佳。其中,鲜重和株高在培养基锌含量为17.2 mg/L时较正常MS处理分别增长了50%和34.66%;叶片的过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和Pro含量较正常MS处理分别增长了9.88%、10%和3.88%,MDA含量较正常MS处理下降了21.86%。结果表明外源施加适量锌可以促进组培苗的生长发育,培养基锌含量为17.2 mg/L时能够显著提高马铃薯组培苗的耐旱性。研究结果为进一步阐明锌调控马铃薯抗旱机制提供了基础。
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    铁氧化菌促进水稻铁膜形成及其对Cd迁移的阻隔
    陈金媛, 靳梦楠, 范芳娟, 马绍晨, 李苏骏, 孙日洋, 李 丁
    2023 (2):  75.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.075
    摘要 ( 143 )   PDF  
    通过硫化亚铁梯度管法和邻菲啰啉分光光度法,研究菌株LLDRA6的铁氧化特性。利用扫描电镜-能谱仪(scanning electron microscope-energy spectrum analysis, SEM-EDS)、连二亚硫酸钠-柠檬酸钠-碳酸氢钠(dithionite-citrate-bicarbonate, DCB)法,以及对两种盆栽水稻籽粒和茎叶的Cd含量检测,探讨菌株LLDRA6对IP形成的影响及其对水稻Cd迁移的阻隔效果。研究表明,LLDRA6在硫化亚铁梯度管中形成明显的Fe(II)氧化圈,接种该菌的LB培养基Fe(II)氧化率高于对照组,表明LLDRA6是一株铁氧化细菌。SEM-EDS显示,经LLDRA6和Fe(II)处理后的水稻根系表面附着有明显的层状沉淀物,沉淀物内含有大量Fe元素。DCB法提取试验显示:经LLDRA6和Fe(II)处理后的根系表面IP含量显著高于其他处理组,表明LLDRA6促进了IP的形成;该处理下的茎叶和籽粒的Cd含量均显著低于其他处理组。菌株LLDRA6促进水稻根系表面IP的形成,以及IP对Cd迁移具有显著的阻隔效果。
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    红螯螯虾雌雄间性个体性腺转录组特征分析
    李 飞, 郑建波, 程 顺, 刘士力, 刘一诺, 贾永义, 迟美丽, 顾志敏
    2023 (2):  80.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.080
    摘要 ( 105 )   PDF  
    为研究红螯螯虾雌雄间性个体与正常个体之间的差异,对红螯螯虾雌雄间性个体和正常个体的精巢和卵巢运用Illumina Novaseq 6000进行转录组测序,同时借助生物信息学开展功能基因预测和基因表达对比分析。通过测序和组装,共获得83.79 Gb质控碱基,各样品质控碱基均达到6.29 Gb以上,Q30碱基百分比在94.25%以上,组装得到的Unigene个数为53077,转录本个数为73588。基因/转录本与6大数据库比对上的比例为18.17%~36.07%。基因表达分析结果表明:样本间共表达的Unigene数为3543个,不同个体卵巢的表达量相关系数最大,不同个体精巢的表达量相关系数次之,卵巢和精巢之间表达量相关系数最小;正常个体的卵巢和精巢与不同雌性间性个体的精巢和卵巢的基因表达量存在差异,累计差异表达的基因有310个。研究认为,红螯螯虾雌雄间性个体不仅在外部形态上与正常个体存在差异,在性腺的转录水平上也存在着差异,且不同类型的雌雄间性个体与正常个体之间的差异程度不同。
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    冬眠期与非冬眠期达乌尔黄鼠小肠AQP1和AQP3基因表达及消化酶活力的比较
    钟秋梅, 王建礼
    2023 (2):  86.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.086
    摘要 ( 124 )   PDF  
    达乌尔黄鼠(Spermophilus dauricus)是一种贮脂类冬眠动物,冬眠期间不摄入食物和水分,在此期间其肠道水通道蛋白(aquaporin, AQP)基因表达和消化酶活力与非冬眠期相比有何不同还不清楚。通过检测夏季活动期(7月)、冬眠期(12月)和春季出眠期(3月)达乌尔黄鼠回肠AQP1和AQP3基因的表达及蛋白酶、麦芽糖酶、蔗糖酶和脂肪酶的活力,探讨不同时期小肠生理生化水平的适应性。结果发现,冬眠期达乌尔黄鼠AQP1基因表达高于夏季活动期和春季出眠期,AQP3基因表达低于活动期和出眠期。冬眠期和出眠期的蛋白酶活力低于活动期;冬眠期麦芽糖酶和蔗糖酶活力低于出眠期;不同时期脂肪酶活力无显著变化。结果表明,达乌尔黄鼠可改变小肠AQP基因表达和部分消化酶的活力调节水分平衡和营养,以适应其冬眠习性和能量需求的变化。
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    综述与专论
    非洲猪瘟病毒调控宿主免疫应答机制研究进展
    袁 理, 熊 丹, 康喜龙, 潘志明, 焦新安
    2023 (2):  91.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.091
    摘要 ( 161 )   PDF  
    非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)编码多种免疫逃逸蛋白以拮抗宿主免疫应答,造成病毒在宿主体内持续感染。非洲猪瘟(African swine fever, ASF)疫苗研发面临的主要困难是对ASFV的毒力相关基因、致病及免疫调控机制知之甚少。对ASFV入侵机体后的免疫调控机制进行总结,从天然免疫和获得性免疫两个角度分析ASFV免疫调控蛋白的功能:调控机体内炎症与干扰素产生,调控抗原呈递与细胞免疫;并探讨潜在的ASFV新型疫苗候选:重组NH/P68弱毒株、融合蛋白ZPMT、基因缺失毒株ASFV-ΔECM3等。为ASFV致病机制研究和新型疫苗研发提供参考。
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    UDP-糖生物合成的研究进展
    陈归航, 李 春, 冯旭东
    2023 (2):  95.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.095
    摘要 ( 980 )   PDF  
    尿苷二磷酸(UDP)-糖是糖基化修饰利用的一类重要糖供体,从合酶途径、磷酸化酶途径和激酶途径总结UDP-糖的体内合成过程,由于关键酶的缺乏,只有UDP-葡萄糖(UDP-Glc)能从以上3种途径快速合成。通过特定功能酶能够实现UDP-糖之间快速转化,这种转化以UDP-葡萄糖为起始物,以UDP-葡萄糖醛酸(UDP-GlcA)为中间体,在此基础上,概述特定功能酶催化UDP-糖合成的最新进展,探讨脱氢酶、脱羧酶、异构酶和还原酶在UDP-糖转化中的重要作用。最后,剖析UDP-糖合成的现存问题,展望UDP-糖合成的未来研究方向,旨在为更快地挖掘UDP-糖基供体的作用潜能和实现更加高效低成本的糖基化修饰提供新思路。
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    NAD+代谢机制及其对衰老相关疾病影响研究进展
    杨鸿辉, 孙 媛, 王新博, 延 卫
    2023 (2):  101.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.101
    摘要 ( 209 )   PDF  
    综述NAD+代谢机制及其对衰老相关疾病的影响研究进展。重点从NAD+的生物合成途径、消耗途径及其调控机制等方面阐述NAD+参与的信号通路和细胞过程,以及它在健康与疾病中的作用,并且以NAD+代谢网络中前体物质和关键酶的作用机理为依据,探讨NAD+代谢调控在衰老相关疾病中的潜在治疗方法,为理解NAD+水平下降和衰老相关疾病之间复杂的因果关系提供新的视角;同时从NAD+及其前体的分布和运输、有毒代谢物的产生和修复、NAD+代谢动态的监测和测量等方面阐述NAD+研究发展过程中存在的瓶颈。最后展望以NAD+为靶点进行疾病治疗和药物开发的广阔前景。
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    技术方法
    驴血蛋白酶解制备抗氧化肽工艺优化
    王 爽, 刘雪松, 江波涛
    2023 (2):  109.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.109
    摘要 ( 121 )   PDF  
    比较经过不同酶处理的驴(Equus asinus)血水解液的抗氧化能力,筛选出抗氧化能力最强的水解液。采用单因素试验及响应面法,优化酶解时间、温度、pH值、酶底比条件,经过试验验证实际的抗氧化活性。对优化后得到的水解液进行超滤,并对不同超滤组分的抗氧化活性进行试验。响应面法得出在pH值为7,时间为3.54 h,酶底比为20%,温度55 ℃的条件下,预计得到的驴血木瓜蛋白酶水解产物DPPH自由基清除率为71.50%,总抗氧化能力为1.53 mmol/g。经过验证得到实际酶解产物DPPH自由基清除率为70.40%±1.33%,总抗氧化能力为(1.51±0.25) mmol/g。将该水解液进行超滤,发现组分3(<3 ku)的抗氧化活性最强,其DPPH自由基清除率为71.26%±5.63%,总抗氧化能力为(1.49±0.36) mmol/g。结果表明,经过木瓜蛋白酶处理的水解液和超滤液具有优良的抗氧化活性,对清除自由基具有优良的效果。
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    教学研究
    细胞生物学线上线下混合式教学思考与实践
    李军林, 崔继红, 王翠玲, 黄 萱, 李 想, 关 锋
    2023 (2):  115.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.115
    摘要 ( 175 )   PDF  
    在近年细胞生物学线上线下混合式教学(online plus offline blending teaching, OPOBT)中,部分师生存在抵触情绪、使用不当等现象,影响了教学质量,结合传统教学范式、前人成果和教学实践,以“细胞死亡”教学内容设计为例,总结提高线上线下混合式教学质量的路径:理性认识和接受线上线下混合式教学;在传统教学范式指引下,开展对学生和教学内容学情分析,制定相应的培养计划,合理重构教学内容;深化和细化教学内容,设计和优化教学模式;持续发展过程性、多元化评价体系,才能有效加强师生互动、激发学生学习兴趣、培养学生创业创新思维与能力。
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    Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡实验
    魏 远, 王宏刚, 陈成彬, 王春国, 宋文芹, 李登文, 赵立青
    2023 (2):  119.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.119
    摘要 ( 370 )   PDF  
    课程组面向本科生开设了利用Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡的实验项目。该实验加入化疗药物依托泊苷(简称VP-16)诱导Jurkat细胞发生凋亡,使用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况,在荧光显微镜下拍照计数。实验结果表明:紫外光激发下,早期凋亡细胞呈现绿色荧光,而晚期凋亡细胞和坏死细胞呈现红色荧光;对细胞计数可知,对照组各时期细胞数符合正常范围,经药物处理后,各时期细胞凋亡率随药物浓度升高而升高,其中早期和晚期凋亡细胞占比最高;在高浓度药物处理后,细胞被大幅度杀伤,仅剩余几个早期凋亡细胞。实验将Annexin V-FITC/PI试剂盒与荧光显微镜结合使用,突破了教学经费、规模和仪器等条件局限,实验成本相对较低,适于大班教学,实验结果直观便捷,能够让学生深入、系统地掌握细胞凋亡的实验原理和检测方法,符合本科生实验项目的综合性高、设计性强和研究性佳的特点,切实提升细胞生物学实验课程的质量和水平。
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    发酵工艺综合实验“五融合”的混合式教学体系创建与实践
    李由然, 石贵阳
    2023 (2):  123.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.123
    摘要 ( 121 )   PDF  
     发酵工艺综合实验是生物工程类本科专业培养学生创新实践能力的核心课程。随着学科进步和行业发展,原有教学体系存在内容设置局限、平台支撑缺乏、组织模式僵化、考核标准单一和实验制度不完善的问题,影响专业人才工程实践和创新能力的培养。针对这一问题,开展生物工程类本科“五融合”发酵工艺综合实验线上线下混合式教学体系的研究与实践,取得了良好的效果。
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    可视化测定病毒滴度及抗病毒药物药效的方法优化
    唐 崎, 曹苑苑, 张欣雨, 朋王平, 芦宝静, 黄升海
    2023 (2):  127.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.02.127
    摘要 ( 221 )   PDF  
    实验课程教学是培养学生创新能力的重要抓手,在生物医学专业的细胞培养课程中,测定病毒滴度和抗病毒药物药效这一综合实验是其重要内容,但是传统的病毒空斑实验在教学中存在诸多问题。首先通过优化传统空斑实验步骤,提高实验效率;其次通过整合空斑实验和药物实验,简化抗病毒药物实验方法;通过定量且可视化的测定病毒滴度和抗病毒药物药效,提高学生的实验技能和科研兴趣。此外,通过前沿技术荧光酶联免疫斑点(Fluo-ELISPOT),可视化和定量检测病毒噬斑(FFU),克服传统空斑实验不能检测致细胞病变效应(CPE)不显著病毒的滴度和抗病毒药物药效,为抗病毒药物研发提供新的实验手段和新的见解。优化的医学生物学实验课程体系提高了细胞课程教学质量,推动了学生实验课程的改革和创新。
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