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当期目次

    2020年, 第37卷, 第6期 刊出日期:2020-12-18 上一期   
    特约专稿
    良师有效指导 促进科学进步
    曼弗雷德·雷茨
    2020 (6):  1.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.001
    摘要 ( 348 )   PDF  
    对博士生和博士后进行有效指导是每位导师的重要职责,因为它确保了科学的进步。然而,囿于个人性格和文化背景,每位导师都有自己独特的风格。但也存在一些国际惯例,其中就包括道德规范。在这篇受邀文章中,结合生物催化背景,介绍指导方式,仅供参考。有效的指导是导师-学生双向的,同时会介绍两者应遵循的准则,如:导师应允许学生针对课题提出自己的见解,并且不应惧怕导师;优秀导师应鼓励学生积极参加国内外的学术会议,并提交报告或海报,积极建立自己潜在的合作社交网络。总是要求学生们一定要实事求是,无论是发表演讲、海报或在网页上,都不要夸大自己的研究结果。导师应投入必要的时间指导学生撰写科技论文,尤其是选题环节。另外,总是鼓励自己的学生周末要充分休息,这样才能以饱满的状态投入到创新研究中。对于国际博士后,还建议他们利用假期或周末远足,如去德国一些城市及其博物馆、剧院等学习当地的文化知识;同时也鼓励德国的博士后有机会到其他国家,如去中国参观学习当地文化知识,这对他们职业生涯的发展非常有帮助。
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    研究报告
    轮状病毒VP3表达载体pEGFP-VP3的构建、表达及功能研究
    杜静, 周艳, 纳璐, 林晓晨, 胡晓青, 汪艺, 李鸿钧
    2020 (6):  7.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.007
    摘要 ( 333 )   PDF  
    通过构建重组表达载体pEGFP-VP3,将pEGFP-VP3转染MA104细胞,观察VP3的表达情况和表达的VP3对轮状病毒复制的作用,进一步评价构建方式是否成功。GFP荧光和Western Blot结果显示,pEGFP-VP3转染MA104细胞48 h,重组蛋白VP3表达量最高。通过RV拷贝数和免疫荧光检测病毒的复制情况,结果均显示重组蛋白VP3可促进病毒复制,为后续更加深入地探究VP3的功能及在轮状病毒复制中的作用提供了实验基础。
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    miR-29对GnRH基因启动子区特定位点甲基化的影响研究
    王欣, 李晓宁, 陈佳贤, 陈贞, 肖君华, 李凯, 周宇荀
    2020 (6):  12.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.012
    摘要 ( 239 )   PDF  
    检测GT1-7细胞中miR-29对GnRH启动子区域甲基化的影响,探究GnRH特定位点的甲基化与其表达量的相关性。采用重亚硫酸盐测序(BSP)结合二代测序技术(NGS)的方法检测GT1-7及miR-29敲除的GT1-7(miR-29KO-GT1-7)细胞中GnRH启动子区7个CpG位点的甲基化程度。根据测序结果,利用CRISPR-dCas9技术在差异显著的CpG6位点特异性富集Dnmt3a、Tet1,并通过二代测序检测该位点甲基化变化,同时利用实时荧光定量PCR技术检测GnRH的表达量,验证二者之间的相关性。结果显示:在miR-29KO-GT1-7细胞中,与对照组相比,在CpG6位点富集Dnmt3a后其甲基化水平上升17%,GnRH的表达水平下降40%(P<0.01);在GT1-7细胞中,CpG6位点富集Tet1,可使其甲基化水平下降20%,GnRH的表达水平上升50%(P<0.05)。结果表明miR-29可通过影响GnRH启动子DNA甲基化水平尤其是特定CpG位点的甲基化程度调控GnRH的表达,为进一步研究解析性发育的调控提供了新的表观遗传机制。
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    不同浓度氮处理对毛果杨天冬氨酸转氨酶酶活性及基因表达的影响
    闵杰, 曹丹, 韩梅
    2020 (6):  17.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.017
    摘要 ( 259 )   PDF  
    通过对毛果杨设立缺氮(0 mmol/L)、正常氮(2 mmol/L)和高氮(10 mmol/L) 3个氮浓度梯度的处理,利用非变性胶测定PtAspAT酶活性和实时荧光定量PCR检测PtAspAT基因转录本的方法,分析毛果杨不同组织中天冬氨酸转氨酶的酶活性和基因表达量的差异,发现:缺氮会导致毛果杨组培苗幼叶、茎段和根中PtAspAT酶(3种同工酶)活性降低,但成熟叶中其活性基本不受影响;转录水平上大多数PtAspAT基因表达量在缺氮时呈现下降趋势,但PtAspAT1、2、6和7除外,它们的表达量反而有所升高。高氮处理下,茎段和根部的PtAspAT酶(3种同工酶)活性显著提高,但是在叶片中其活性会略微下降;转录水平上除PtAspAT4、5和6在高氮条件下略有降低外,PtAspAT其余各基因表达水平总体提高。PtAspAT线粒体同工酶活性随着氮浓度的增加而提高,然而相应的PtAspAT基因的mRNA表达量与酶活性变化趋势并不一致,表明PtAspAT在植物体内的调控机制比较复杂,可能有转录或翻译后机制参与。研究为进一步深入了解天冬氨酸转氨酶在植物中的生理作用和调控模式奠定了重要基础。
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    Cpf1核酸酶的原核表达、纯化及多克隆抗体制备与鉴定
    董彬, 王君, 孙静, 王报贵, 孙春龙, 吴涛
    2020 (6):  23.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.023
    摘要 ( 292 )   PDF  
    将Cpf1核酸酶N端166个氨基酸的DNA编码序列克隆至pET-28a(+)质粒中,在大肠杆菌BL21中进行重组表达,对诱导其表达的IPTG浓度和诱导时间开展条件优化。利用6×His纯化标签得到的重组蛋白作为抗原进行动物免疫,间接ELISA方法测定免疫后抗血清效价达到128 000,并经Protein A纯化后得到抗体,Western Blot分析抗体的特异性,结果显示可以特异性识别大肠杆菌中表达的Cpf1(1-166)和Cpf1,为Cpf1在生物体中的检测提供工具,且将为推动CRISPR/Cpf1系统在生物体中的应用奠定良好的实验基础。
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    基于FOXM1启动子示踪体系对MDA-MB-231细胞亚群的分选与鉴定
    汪运超, 李子青, 向勤, 谭拥军
    2020 (6):  28.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.028
    摘要 ( 285 )   PDF  
    为实现细胞内FOXM1表达的可视化,采用基因工程的方法构建慢病毒载体(Lv-PromoterFOXM1-GFP)。该慢病毒载体携带1.2 kb的FOXM1启动子区域和绿色荧光蛋白(GFP)基因。将Lv-PromoterFOXM1-GFP与辅助质粒共转染HEK293T细胞, 包装慢病毒并感染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞。以未感染病毒的MDA-MB-231细胞样品作为阴性对照,经流式细胞仪分析,发现实验组GFP阳性细胞数升高,证明慢病毒感染成功。以GFP的表达为标准,将Lv-PromoterFOXM1-GFP感染的MDA-MB-231细胞通过流式分选,获得GFP-High细胞亚群和GFP-Low细胞亚群。通过Western Blot证实根据GFP所分选出的两组细胞亚群的FOXM1表达量有显著差别,且GFP水平可以对应细胞内的内源FOXM1表达水平。因此在癌细胞中以FOXM1表达水平的高低分离出癌细胞亚群,为研究FOXM1在乳腺癌发生发展中的功能提供了研究材料,也对进一步研究FOXM1的生物学特性以及靶向肿瘤诊断与治疗具有十分重要的意义。
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    利用CRISPR/Cas9系统构建人HIF-1α基因敲除细胞株
    杨芳, 张宝云, 向伟, 王凭青, 向远彩
    2020 (6):  33.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.033
    摘要 ( 409 )   PDF  
    在人源HIF-1α的PAS结构域内设计特异性靶点,构建Cas9-gRNA-HIF-1α敲除质粒,并将其转染至细胞后经嘌呤霉素筛选出21个单克隆细胞株,随后通过酶切、测序分析及下游基因验证等方法检测,最后得到一株特异性敲除HIF-1α的纯合子细胞(H20)。所设计的靶点能够有效地编辑HIF-1α,将为在其他细胞中通过CRISPR/Cas9系统特异性敲除HIF-1α提供方法借鉴。与此同时,也将为后续揭示HIF-1在由正常排卵事件演变成卵巢肿瘤过程中的作用机制奠定基础。
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    山竹果皮提取物“芒果醚”抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖与迁移
    黄凯悦, 刘敏燕, 陈婷, 陆昌瑞, 赵越, 邵志宇, 张云龙
    2020 (6):  38.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.038
    摘要 ( 252 )   PDF  
    从山竹(Garcinia mangostana)果皮内提取和鉴定了一种黄酮类化合物“芒果醚”,虽已证实其具有抑瘤作用,但机制不清。为了检测此芒果醚对乳腺癌细胞增殖抑制效果,以正常人乳腺细胞MCF-10作为对照,探析了其对MCF-7、SUM1315MO2和MDA-MB-231 3种乳腺癌细胞增殖的影响,证实其对MCF-7细胞具有剂量和时间依赖性抑制作用,24 h给药处理的IC50值为20 μmol/L,同时出现凋亡小体。蛋白质免疫印迹反应检测凋亡信号途径显示:Bcl-2剂量依赖性下调,而Bax上调,Cytochrome C显著上调,Precaspase-9也明显下调,这表明芒果醚通过促发线粒体依赖性凋亡途径而抑制了MCF-7增殖。另外,划痕实验检测结果显示,芒果醚可有效减弱MCF-7细胞迁移。山竹果皮提取物“芒果醚”具有抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖与迁移作用,为其用于抗癌治疗开发提供了相关依据。
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    维氏气单胞菌acrR敲除株的构建
    胡康, 张伊动, 唐燕琼, 李宏, 马香, 刘柱
    2020 (6):  42.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.042
    摘要 ( 361 )   PDF  
    从维氏气单胞菌C4(A. veronii C4)基因组DNA中扩增得到acrR基因上游同源臂片段和下游同源臂片段,连接到自杀质粒pRE112中以构建敲除重组质粒pRE112-ΔacrR,并通过电转化将敲除重组质粒导入大肠杆菌WM3064中,再通过双亲接合将其转入维氏气单胞菌C4中,以筛选得到acrR基因敲除的维氏气单胞菌突变株。生长曲线测定结果显示acrR基因敲除不会影响维氏气单胞菌的生长。生物膜测定表明,敲除acrR基因的维氏气单胞菌株表现出生物膜的形成显著增加。所构建的敲除株为进一步探索AcrR在维氏气单胞菌中的功能提供了必要材料,并提示AcrR在细菌生物膜形成中的潜在调控功能。
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    白囊耙齿菌锰过氧化物酶基因的表达和酶学分析
    崔周磊, 王洪成, 武俊明, 陈华友
    2020 (6):  46.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.046
    摘要 ( 277 )   PDF  
    将源于白囊耙齿菌(Irpex lacteus)的一种锰过氧化物酶(manganese peroxidase,MnP)基因进行密码子优化后连接于表达载体pET-28a,并在E.coli BL21中表达,重组锰过氧化物酶经镍离子亲和层析分离得到纯酶,其分子质量和比酶活分别为43 ku和24 U/mg。酶学性质研究表明,重组锰过氧化物酶的最适反应温度为40 ℃,最适反应pH值为3.0,且该重组酶在 20 ℃~50 ℃、 pH 2.5~3.5 范围内稳定性较好。当添加的金属离子浓度为10 mmol/L,Na+、Ca2+和Mg2+对重组酶酶活有促进作用;当添加的金属离子浓度为5 mmol/L时,除Ca2+外,其他金属离子均能抑制重组酶的活力;Fe2+、Cu2+在10、5和1 mmol/L离子浓度下均对重组酶有明显的抑制作用。重组锰过氧化物酶在48 h内可以有效降解玉米秸秆中35.8%及麸皮中27.3%的木质素,降解效果显著。
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    拟南芥铜锌超氧化物歧化酶解聚的中间态性质
    刘祚军, 黄胜威, 李明浩, 吴丽芳
    2020 (6):  51.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.051
    摘要 ( 226 )   PDF  
    拟南芥铜锌超氧化物歧化酶(AtSOD1)是理想的研究植物SOD酶结构与功能关系的模式蛋白,对于理解植物抗逆性有着重要的意义。目前对该酶稳定性、活性等基本性质了解得不够充分,影响了相关研究的开展。研究在大肠杆菌中异源表达出具有生物活性的AtSOD1蛋白,通过电子顺磁共振波谱(EPR)检测,活性中心电子结构准确。对AtSOD1的稳定性进行研究,其中,AtSOD1的尿素解折叠实验的圆二色谱(CD)结果发现,在225 nm附近出现了一个α-螺旋和β-折叠比例变化的拐点,且当尿素浓度为4~5 mol/L时,天然态AtSOD1解折叠曲线出现了一个平台期。在利用差示扫描量热(DSC)检测天然态AtSOD1的物理稳定性时发现,该酶在单体重构为二聚体过程中,也存在两个Tm值,分别为102.2 ℃和100.5 ℃。根据上述结果,推测认为,AtSOD1从二聚体解聚为单体过程中存在一个中间态,与该酶结构稳定性有关。
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    两株苯唑草酮降解细菌的筛选与降解能力测定
    杨峰山, 孙丛, 唐若瑶, 马玉堃, 付海燕, 刘春光
    2020 (6):  55.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.055
    摘要 ( 223 )   PDF  
    使用富集驯化、种属鉴定、高效液相色谱(HPLC)等方法,从施用苯唑草酮的玉米田土壤中分离筛选出两株能够以苯唑草酮(500和5 mg/L)为唯一碳源生长和降解的细菌TOB1和TOB2,分别属于Acinetobacter sp.(不动杆菌属)和Pseudomonas sp.(假单胞菌属)。菌株TOB1和TOB2对苯唑草酮具有较强的耐受性和降解能力,对于苯唑草酮污染的土壤生物修复具有很好的应用潜力。
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    西藏濒危植物大花黄牡丹内生真菌及其根际土壤真菌的群落多样性研究
    禄亚洲, 张二豪, 尹秀, 蔡皓, 袁雷, 李连强, 赵垦田, 兰小中
    2020 (6):  59.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.059
    摘要 ( 225 )   PDF  
    以西藏特有濒危藏药材大花黄牡丹为材料,利用高通量测序技术对大花黄牡丹不同组织内生真菌及根际土壤真菌的ITS(Internal transcribed spacer)序列进行测序和分析。结果表明:所有样品中共获得真菌OTUs (Operational taxonomic units)796个,其中,根部228个,茎部55个,叶部70个,花部110个,果实69个,上、中、下根际土壤分别为421、319和258个,隶属8门13纲27目50科67属。大花黄牡丹不同植物组织中共有5个OTUs,不同深度根际土壤共有135个OTUs。Biomarker分析表明在植物组织中的标志类群是Mycosphaerellaceae和Cladosporiaceae,土壤中的标志性类群是Nectriaceae。不同大花黄牡丹组织内生真菌群落丰富度和多样性不同,其根部内生真菌物种最丰富。不同深度根际土壤中真菌具有相似的丰富度与多样性,根部和根际土壤中真菌群落组成相似。植物组织及根际土壤中的标志类群可能具有药用功能,为大花黄牡丹内生真菌和根际真菌的进一步研究奠定了基础。
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    24-表油菜素内酯对高山离子芥悬浮细胞抗寒性的影响
    刘亚洁, 安黎哲
    2020 (6):  64.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.064
    摘要 ( 195 )   PDF  
    为了进一步研究油菜素内酯(brassinosteroids, BRs)在植物遭受低温胁迫时所发挥的作用,利用24-表油菜素内酯(24-epibrassinolide, EBR)处理高山离子芥(Chorispora bungeana)悬浮细胞并在0 ℃处理5 d,发现经过EBR处理后的悬浮细胞中的脯氨酸、可溶性蛋白和可溶性糖含量显著增加,表明EBR能够诱导细胞中渗透调节物质的大量积累,从而增强细胞对低温胁迫的抗性。同时,EBR处理提高了悬浮细胞的苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase, PAL)活性,表明EBR可能通过激活苯丙烷类代谢防卫系统来抵御低温对细胞造成的损伤,以增强其抗寒性。此外,EBR诱导低温胁迫初期细胞CbCOR15基因大量表达,这有利于防止细胞膜六角形HII相位的产生,对稳定细胞膜的结构和从分子水平提高其抗寒性具有重要的意义。
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    百合科植物psbA基因密码子偏好性分析
    倪典墨, 李冉郡, 郭忠静, 高玲玲, 周嘉裕, 廖海
    2020 (6):  68.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.068
    摘要 ( 311 )   PDF  
    利用CodonW、CHIPS与CUPS等程序对60种百合科植物psbA基因的密码子偏好性展开分析,结果发现有26种密码子具有偏好性,其中12个极强,10个密码子在psbA中出现率极低,13个密码子没有出现。ENc平均值为37.84,显示出密码子偏好性较弱。GC和GC3s平均值分别为42.5%和48.0%,表明密码子组成偏向A与U碱基,且倾向于以A/U结尾。CAI的平均值为0.218,说明密码子的表达水平偏低。ENc-plot表明密码子偏好性主要受到自然选择的影响。聚类分析表明,基于CDS序列的聚类比基于RSCU更适合作为百合科植物系统发育分析。
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    水分胁迫对不同发育时期藜麦生理的影响
    田计均, 唐媛, 董雨, 余海萍, 孙雁霞
    2020 (6):  73.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.073
    摘要 ( 245 )   PDF  
    为了探究水分胁迫对不同发育时期藜麦生理的影响,用30%质量分数聚乙二醇6000(PEG6000)溶液模拟干旱条件和双套盆法模拟水涝条件,测定幼苗期、现蕾期、花期和灌浆期藜麦的渗透物质含量和生理指标。结果发现,与对照组相比,在干旱和水涝胁迫下4个时期藜麦的可溶性蛋白(SP)含量均无明显差异,幼苗期可溶性糖(WSS)含量降低,其他时期显著增加。在干旱胁迫下,灌浆期过氧化物酶(POD)活性无明显变化,其他时期显著上升。现蕾期和花期的丙二醛(MDA)含量升高,其他时期下降或无明显变化。在水涝胁迫下,4个时期藜麦的POD活性均显著升高。仅现蕾期MDA显著增加,其他时期无明显变化。这些结果表明藜麦可以通过提高WSS的含量和POD活性减少水分胁迫的不利影响,同时干旱对现蕾期和花期藜麦及水涝对现蕾期藜麦具有较大影响,幼苗期和灌浆期藜麦对水分胁迫均表现出较强的耐受性。
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    椿叶花椒在安徽省的新分布
    陈婕, 姜春前, 张旭东, 白彦锋, 刘建中, 李士贵
    2020 (6):  77.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.077
    摘要 ( 378 )   PDF  
    于2019年8月在安徽省青阳县野外踏查时发现了芸香科(Rutaceae)花椒属(Zanthoxylum)一新分布种——椿叶花椒(Zanthoxylum ailanthoides Sieb. et. Zucc.)。在相关文献中均未报道该物种在安徽省的分布。这一发现对于中国植物区系研究和植物多样性保护具有重大意义。
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    横断山云南山区不同地区大绒鼠种群的表型多样性
    任月, 贾婷, 章迪, 张浩, 王政昆, 朱万龙
    2020 (6):  79.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.079
    摘要 ( 222 )   PDF  
    为揭示横断山云南山区不同地区大绒鼠(Eothenomys miletus)种群表型性状是否存在地理差异,采集德钦、香格里拉、丽江、剑川和哀牢山等5个地区大绒鼠,采用单因素方差、主成分、聚类等分析对大绒鼠体长、尾长和躯干长等24个表型性状进行表型多样性分析。结果显示:24个表型性状在种群间存在显著差异,变异非常丰富; 种间变异(0.2662)大于种内变异(0.0264),种间变异是表型变异主要因素,种间平均表型分化系数(VST)为87.54%,分化水平相对较大; 表型性状平均变异系数(CV)为4.80%(1.99%~8.66%);主成分分析表明德钦和香格里拉种群集中在一起;基于大绒鼠表型形态学数据构建模拟聚类分析关系图,将5个群划分为2大类。以上结果表明横断山云南山区不同地区大绒鼠表型性状出现地理差异,这可能与动物适应环境相关。
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    藤黄健骨胶囊对膝骨关节炎大鼠血细胞变化及炎症因子表达的影响
    颜春鲁, 安方玉, 蒋国凤, 赵崇博, 李嘉进, 李孟翰, 郭丹
    2020 (6):  84.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.084
    摘要 ( 232 )   PDF  
    观察藤黄健骨胶囊对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠右后足足跖厚度、血细胞变化及炎症因子IL-6和IL-2表达的影响,并探讨藤黄健骨胶囊治疗 KOA的作用机制。将60只SPF级SD雌性大鼠随机分为假手术组、KOA模型组、阳性对照组和藤黄健骨胶囊高、中、低剂量组。改良Hulth 法复制KOA大鼠模型。假手术组和KOA模型组给予等体积蒸馏水灌胃,阳性对照组给予仙灵骨葆胶囊(0.27 g/kg),藤黄健骨胶囊高、中、低剂量组给予藤黄健骨胶囊灌胃(0.36、0.18和0.09 g/kg)。末次给药结束24 h后,HE染色法观察各组大鼠软骨组织的病理形态学变化,并进行Mankin评分。采用游标卡尺测量法测定各组大鼠右后足足跖的厚度、全血自动分析仪检测各组大鼠白细胞(White blood cell,WBC)、中性粒细胞(Neutrophils,N)、淋巴细胞(Lymphocyte,L)、单核细胞(Monocytes,M)和嗜酸粒细胞(Eosinophils,EOS)的变化,ELISA法测定各组大鼠炎症因子IL-6和IL-2的含量。结果表明藤黄健骨胶囊各剂量组能显著降低KOA模型大鼠右后足足跖厚度、WBC、N/L和白细胞介素-6(Interleukin,IL-6)等指标,藤黄健骨胶囊中、高剂量组能够显著降低KOA模型大鼠Mankin评分和N数目,显著升高KOA模型大鼠的L数目,藤黄健骨胶囊高剂量组能够显著降低KOA模型大鼠白细胞介素-2(Interleukin,IL-2)含量(P<0.05)。这说明藤黄健骨胶囊可以减轻KOA疼痛和延缓软骨退变,可能与减少炎症细胞数目和炎症细胞因子含量有关。
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    北京金海湖浮游生物群落结构及富营养化评价
    王哲, 赵文, 魏杰, 李博, 时晓, 王天宇, 董成浩, 尹东鹏
    2020 (6):  88.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.088
    摘要 ( 223 )   PDF  
    为了解南水北调北京后金海湖浮游生物群落结构特征及富营养化现状,分别于2017年5、9月和2018年5、9月对金海湖展开水质及浮游生物综合调查。结果表明,金海湖属硅藻-蓝藻型水库,水型为CNaⅠ型:检出浮游植物8门111种(变种),平均密度为4.10×106 ind/L,生物量为6.68 mg/L,多样性指数H′为2.94±0.53,均匀度J为0.73±0.37;检出浮游动物56属97种,平均密度为1 453 ind/L,生物量为0.70 mg/L,H′为3.07±0.09,J为0.64±0.08。4次均为优势种的有尖脆杆藻(Fragilaria acus)、小单环栉毛虫(Didinium balbianii)、螺形龟甲轮虫(Keratella cochlearis)和简单前翼轮虫(Proales simplex)。划分出27个浮游植物功能群,代表性功能群变化:2017年春(D/lM /LO/P/E)、秋(D/T/J/TC/NA),2018年春(D/P/J/NA)、秋(D/T/NA/S1/N)。TLI指数为43.57,属于中营养型。金海湖鱼产力为350.3 kg/hm2,全库最大鱼产力为2.3×105 kg。
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    综述与专论
    人工细胞构筑途径研究进展
    贺亚青, 郭振振, 刘巧玲
    2020 (6):  94.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.094
    摘要 ( 535 )   PDF  
    人工细胞是具有类似细胞结构和功能的人造生命体。作为简化的生命体,人工细胞具有代谢、繁殖等天然细胞的一些特征,同时也具有类似活细胞所具备的吞噬、胞间通讯等细胞行为和功能。模拟细胞的结构和功能,将复杂的细胞结构和功能简单化,从而构筑特定结构和功能的人工细胞是目前研究热点。研究人员采用自上而下和自下而上两种途径构筑人工细胞、自上而下途径主要利用生物学方法对现有生物或基因序列进行重新设计,敲除非必需基因,从而获得具有类似细胞功能的人工细胞;自下而上途径则利用非生命组分的人工模块作为原材料来构筑生命系统。基于人工模块的可操控性和可设计性,采用自下而上的方法构筑人工细胞操作简单、可重复性好。综述了人工细胞自上而下和自下而上的构筑途径,并对自下而上途径中人工细胞的区室化、生长和分化、信息交流和能量供应系统进行总结和分析。
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    白藜芦醇对线粒体质量调控研究进展
    张虎, 梁计陵, 钱帅伟, 蒋留军, 陈宁
    2020 (6):  99.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.099
    摘要 ( 401 )   PDF  
    白藜芦醇(Resveratrol,Res)是一种天然植物多酚,有抗氧化、抗炎、降低血小板聚集、改善心血管疾病等作用。线粒体作为机体主要供能细胞器,在维持机体正常运转中具有重要作用。越来越多研究发现Res可有效调控线粒体质量达到防治代谢、神经等系统疾病的作用,而Res的使用剂量在不同模型、干预途径和时间均存在一定差异。因此,就Res对线粒体的生物发生、融合与分裂、线粒体自噬以及其使用剂量等方面做一探讨,以期为更合理使用Res在调控线粒体质量改善相关疾病方面提供理论参考。
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    互花米草入侵对东部沿海生境的影响
    王大卫, 沈文星, 汪浩
    2020 (6):  104.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.104
    摘要 ( 250 )   PDF  
    选取东部沿海最有代表性的3个区域分别为闽江口湿地、崇明东滩湿地以及盐城丹顶鹤保护区作为研究对象,分别从养分分配机制、群落特征和生物量及有机质的差异方面研究互花米草入侵的机制。分析显示,其入侵能力强的主要原因是高于其他植物的基因渗入能力和高遗传分化能力。同时,根据互花米草对滩涂动植物和水鸟种群分布两方面研究其对东部沿海的生境的影响。在此基础上,提出应更多地采取综合治理的方法,并以研发其利用价值为核心,进一步加强对互花米草入侵的控制和防治。
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    技术方法
    流感嗜血杆菌单克隆抗体免疫层析试纸的研制
    郝惠文, 陶冶, 宋慧茹, 杨波, 王毅, 胡征
    2020 (6):  108.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.108
    摘要 ( 225 )   PDF  
    为研制快速检测流感嗜血杆菌胶体金免疫层析试纸,用P6重组蛋白免疫小鼠,通过单克隆抗体技术制备杂交瘤细胞,经腹水制备、亲和纯化得到单克隆抗体,利用双抗夹心原理研制免疫层析试纸。结果成功筛选并制备出两株抗P6重组蛋白单克隆抗体,其效价均达到1∶ 512 000,经Western Blot验证均能特异性识别流感嗜血杆菌天然P6蛋白,两株单抗KD值分别为10-9和10-10,亲和力较好,建立的检测方法能在10 min内快速检测流感嗜血杆菌,且与常见9种呼吸道病原菌无交叉反应,经加速稳定实验测试,可在常温下保存使用1年,具有良好的重复性和稳定性。制备了抗流感嗜血杆菌P6的特异性单克隆抗体,并研制了以单克隆抗体为基础的胶体金免疫层析试纸,实现了人流感嗜血杆菌的快速、简便的检测。
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    教学研究
    生态学研究型野外实习的设计与实践
    何磊, 于明坚, 丁平
    2020 (6):  112.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.112
    摘要 ( 255 )   PDF  
    为了积极推进新时期生态学科“双一流”建设步伐,依托生态学科研教学基地,结合生态学野外实习教学经验,探讨研究型生态学野外实习的教学理念、实习安排及教学考核等。研究型野外实习将科研与实践教学有效融合,该实习特别强调生态学研究方法、数据分析处理、PPT展示及小论文的撰写。实践结果表明,野外实习激发了学生对生态学的学习兴趣,拓展了学生对生态学理论知识及研究方法的应用能力,提高了学生探索与参与实习的热情,为生态学专业创新型、研究型及应用型人才的培养奠定了基础。
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    “以学生为中心” 的生物类专业课程在线教学设计与实践
    郜原, 张岁玲, 武小椿, 杨德龙, 司怀军
    2020 (6):  116.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.116
    摘要 ( 252 )   PDF  
    为了实现“教学标准不降低,教学效果不打折”的要求,进行“以学生为中心”的在线教学设计与实践,探索“网络课程学习为主+网络直播教学为辅+翻转式教学为提升”相结合的教学模式,通过摸索和优化直播教学效果、构建系统的网络课程学习社区、探索和创新翻转式在线教学相结合的方式,取得了良好的实践效果。“以学生为中心”的在线教学设计实践有助于推动信息化教育的发展,也为优化和改进线下教学、提升高校教师的教学设计能力提供了参考。
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    P值争论对生物统计学课程教学的影响
    彭佳师
    2020 (6):  120.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.120
    摘要 ( 327 )   PDF  
    P值在当前生物学数据的统计学分析所广为接受的规范中处于核心位置,大多数的数据分析结果最终用P值来体现,并依此作出科学问题的推断。然而,随着对P值的误解以及P值局限性讨论的深入,特别是对于实验结论可重复性的焦虑,引起了学术界对P值使用的激烈争论。P值的误用以及P值争论的出现也从侧面折射出在大学和研究生教育中生物统计学课程教学存在的不足。在简要介绍P值争论的基础上,探讨当前P值争论引起的对生物统计学课程教学的一些反思和启示。
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    运用血液指标和杀菌能力测定推进动物学设计性实验改革的实践与体会
    张云龙, 袁小琛, 朱若林, 杨启超, 张志强
    2020 (6):  123.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.123
    摘要 ( 228 )   PDF  
    结合新兴学科免疫生态学的研究进展,围绕动物学设计性实验的开设现状,阐述了开设设计性实验的必要性,总结运用血液指标和杀菌能力测定推进动物学设计性实验教学改革的做法与体会。基于低年级本科生具有从事创新性科学研究的潜力,建议增加设计性实验的比例。
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    兔的形态结构与功能虚拟仿真实验的构建与应用
    傅媛媛, 王爱勤, 李世平, 杨凤萍, 殷宝法, 魏万红
    2020 (6):  126.  doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.06.126
    摘要 ( 246 )   PDF  
    为了解决传统实验教学中存在的手术操作不易掌握,部分器官微小、易损,结构与生理的协同作用不可见等问题,构建了“兔的形态结构与功能的虚拟仿真实验”,并通过实施“虚实结合”的实验教学模式和形成性实验考核体系,调动了学生学习的兴趣和主动性,有效提升了实验教学效果,实现了实验项目完整、高效、绿色和环保。
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