生物学杂志

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“十四五”背景下合成生物学产业发展趋势分析

王浩绮, 高　豪, 信丰学

生物学杂志 2023, 40 (3): 1-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.001

摘要（572）

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合成生物学的快速发展正在改变生物技术行业的产业布局。目前，合成生物技术已经广泛应用于天然产物合成、医学、能源、工业等多个领域。伴随我国《“十四五”生物经济发展规划》的颁布，被誉为“第三次生物科技革命”的合成生物学研究热度高涨。合成生物学凭借更经济、环境友好等突出特点，将颠覆相当一部分传统行业。梳理我国合成生物学领域行业政策和国内合成生物学产业，并针对合成生物学在生物基化学品、生物制药、农业、食品、医美和化妆品领域的作用进行重点阐述，同时对其未来发展进行展望。

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促凋亡蛋白Bax和Bak通过Nrf2/GPX4信号通路调控铁死亡

韩　靖, 赵国平

生物学杂志 2023, 40 (3): 6-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.006

摘要（568）

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为探究促凋亡蛋白Bak/Bax对erastin诱导铁死亡的调控机制，以野生型（WT）、Bak/Bax双敲除（Bak/Bax-DKO）、Bax敲除（Bax-KO）和Bak敲除（Bak-KO）的小鼠成纤维细胞（MEFs）为实验对象，利用CCK-8和流式细胞术检测细胞存活率和活性氧（ROS）的生成量，利用试剂盒测定GSH/GSSG水平，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和蛋白质免疫印迹（Western Blot）检测相关基因和蛋白的表达水平。结果显示：与野生型细胞相比，敲除Bak和Bax显著抑制erastin诱导的铁死亡，RT-qPCR和Western Blot检测发现，相比WT细胞，Bak/Bax-DKO细胞中核因子NF-E2相关因子2（Nrf2）和谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）蛋白、GPX4 mRNA表达水平明显升高。进一步研究发现：与Bak/Bax双敲除类似，敲除Bax也显著抑制erastin诱导的铁死亡，促进GPX4的蛋白表达水平；而敲除Bak对erastin诱导的铁死亡及GPX4的蛋白表达水平无明显影响。结果表明，促凋亡蛋白Bax和Bak通过Nrf2/GPX4信号通路抑制erastin诱导的铁死亡，且Bax在其中起主导作用。

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青藏高原垫状点地梅耐冷纤维素分解菌株的筛选与鉴定

朱　攀, 薛文凯, 刘　星

生物学杂志 2023, 40 (3): 48-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.048

摘要（125）

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为获得垫状点地梅(Androsace tapete)垫状结构中的耐冷纤维素分解菌，以3个地区不同生存状态的垫状点地梅地上部分为材料，采用纯培养方法分离和纯化可培养微生物，并在4 ℃和15 ℃条件下分别用CMC固体培养基和CMC-刚果红固体培养基筛选出耐冷纤维素分解菌，对筛出的菌株进行16S rRNA和ITS区域序列的分子鉴定。结果表明，实验共获得52株14属32种耐冷纤维素分解菌，包括3种细菌、9种酵母菌和20种丝状真菌。耐冷纤维素分解菌的相对纤维素酶活性较高，代表菌株有楸子茎点霉（Didymella pomorum）、出芽短梗霉（Aureobasidium pullulans）、戈茨青霉（Penicillium goetzii）、灰玫瑰青霉（Penicillium griseoroseum）。来源于不同垫状点地梅个体之间以及叶际和内生的耐冷纤维素分解菌之间物种组成差别较大，但相对纤维素酶活性无显著差异。这些耐冷纤维素分解菌可以有效分解垫状结构中的凋落物，促进碳循环，在垫状点地梅适应极端环境并行使生态系统工程师功能中发挥重要作用，活性较高的菌株可以为寒冷地区生物降解纤维素的工业应用提供材料。

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合成生物学课程思政元素的挖掘与实践

王冬梅, 洪　泂

生物学杂志 2023, 40 (3): 124-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.124

摘要（135）

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根据合成生物学课程的教学内容践行课程思政教学，明确教学目标，通过科学设计和教学实施，将课程中蕴含的思政元素有机融入相关的教学内容。注重学思结合，知行统一，实现对学生的正确价值观的塑造、知识的传授和能力的培养，从而激发学生科技报国的家国情怀和使命担当。在课程思政实施过程中，教师课程思政建设的意识和能力也得到了提升，加强了自身德育修养，打造了师生双赢的局面，为构建大思政格局作出初步的探索和实践。

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常压室温等离子体技术在微生物诱变育种中的研究进展

陆　欢, 沈　玲, 尚晓冬, 刘建雨, 王瑞娟, 杨　慧

生物学杂志 2023, 40 (4): 92-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.04.092

摘要（220）

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主要阐述常压室温等离子体诱变（ARTP）技术的概念、诱变机理和影响诱变效果的因素，以微生物和食用菌诱变育种为主要内容，重点介绍ARTP诱变技术在细菌、放线菌和酵母等微生物菌种改良和提升生物合成能力方面的应用，以及在食用菌新品种选育等研究中的应用，分析ARTP诱变技术在微生物和食用菌育种研究中具有的优势以及面临的挑战，并说明今后研究重点是通过提高快速筛选目标菌株的技术水平，结合高通量测序、转录组和蛋白质组等多组学技术，深入探究经ARTP诱变后微生物和食用菌的遗传规律和调控生物活性物质合成的机制，以期通过新技术的建立和应用，为食用菌和微生物育种研究提供新思路，进而推动微生物和食用菌的种质创新及产业可持续发展。

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生淀粉水解α-淀粉酶AmyZ1热稳定性提升的分子改造

邴孝凤, 何　玉, 张学成, 方泽民, 房　伟, 肖亚中

生物学杂志 2023, 40 (3): 35-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.035

摘要（111）

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生淀粉水解α-淀粉酶是一种具有生淀粉水解能力的α-淀粉酶，能够在淀粉糊化温度以下降解生淀粉颗粒，适用于淀粉冷水解。ΑmyZ1是来源于海洋微生物的生淀粉水解酶，其催化底物转化应用时热稳定性不足。与热稳定α-淀粉酶结构进行比对分析，发现AmyZ1在结构域B区域多了一个柔性loop区。通过同源建模，确定突变位点，构建缺失柔性区的突变酶AmyZ1∶ΔTG，并对突变酶的酶学性质、Ca2+依赖以及水解高浓度玉米生淀粉的能力进行分析。AmyZ1∶ΔTG最适作用温度为45 ℃，在35 ℃~55 ℃范围内酶活力维持在60%以上。在30 ℃和35 ℃条件下，半衰期可分别达到18 h和15 h，是出发酶AmyZ1的10倍和15倍。突变酶AmyZ1∶ΔTG蛋白结构的柔性降低，导致AmyZ1∶ΔTG的催化效率有所降低。与出发酶AmyZ1相比，AmyZ1∶ΔTG的催化性能受外源Ca2+的影响较小，酶活力对外源Ca2+的依赖有所降低，但Ca2+有助于提升其热稳定性。此外，在35 ℃的作用条件下，AmyZ1∶ΔTG对300 g/L玉米生淀粉的水解率为40%，接近于出发酶AmyZ1。

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基于线粒体16S rRNA基因序列探讨中气门亚目的系统发育关系

杨慧娟, 陈　婷, 董文鸽

生物学杂志 2023, 40 (4): 48-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.04.048

摘要（107）

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为了解中气门亚目物种线粒体16S rRNA基因全序列信息及系统发育关系，采用PCR方法对粪堆寄螨（Parasitus fimetorum）的线粒体基因组进行测序，并结合NCBI数据库中中气门亚目多数类群的序列信息。利用生物信息学软件对中气门亚目物种的线粒体16S rRNA基因进行比较分析，进一步探讨中气门亚目物种间的系统发育及亲缘关系。结果表明：中气门亚目物种线粒体16S rRNA基因的AT含量远高于GC含量；遗传距离在0.111~0.359，平均遗传距离为0.291。碱基转换与颠换比值以及序列饱和性分析显示，中气门亚目物种线粒体16S rRNA基因具有较大的进化潜能，适合用于系统发育分析。使用ML法和BI法构建的系统发育树显示寄螨科与土革螨科形成姐妹分支，与传统分类结果存在差异；大部分同科的物种总是优先聚在一起，表明线粒体16S rRNA基因用于构建中气门亚目的系统发育关系具有稳定、可靠的特点。结果为后续研究中气门亚目物种的系统发育关系奠定基础。

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本科生基因工程实验课程基因克隆构建方案

陆盈盈, 樊伟康, 韦有恒

生物学杂志 2023, 40 (3): 119-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.119

摘要（165）

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将常用于Gateway克隆系统中的对大肠杆菌具有毒性ccdB基因引入载体，提高基因克隆成功率。构建基因克隆过程中，含有ccdB 基因的原始载体在大肠杆菌中不能正常生长，无法形成细胞克隆，避免空载的假阳性克隆产生。通过分组比较实验、启发引导的教学设计，可以让学生充分领会酶切、重组、连接等生物工程相关操作，加深学生对理论课程的理解。该基因克隆方法的改进能够满足实验教学的需要，也适用于科研工作中的基因克隆效率的提高。

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双壳贝类血浆蛋白质颗粒构成与特性

夏淇峰, 刘优利, 阮紫燕, 张卫卫, 林志华, 薛清刚

生物学杂志 2023, 40 (3): 85-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.085

摘要（105）

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选择长牡蛎（Crassostrea gigas）、厚壳贻贝（Mytilus coruscus）、文蛤（Meretrix meretrix）、缢蛏（Sinonovacula constricta）、魁蚶（Scapharca broughtonii）等5种系统分类学有代表性的双壳类物种，利用2种纯化方法结合透射电子显微镜观察，分析血浆蛋白颗粒的存在与否和形态特征。发现除缢蛏外，其他4种双壳贝类的血浆蛋白形成相似的颗粒形态，但大小存在差异。同时，结合SDS-PAGE和氨基酸序列测定鉴定血浆蛋白颗粒的主要蛋白质构成。以长牡蛎血浆蛋白颗粒为代表，观察纯化蛋白颗粒的金属离子解离和结合特征。结果显示：其自然携带的Ca2+可以通过透析排出，在不同质量浓度的金属离子处理时，高质量浓度组的金属结合均高于低浓度组；相同金属离子质量浓度下长牡蛎血浆蛋白颗粒中不同金属离子的含量不同（Cd2+> Pb2+>Ca2+> Zn2+）。双壳贝类物种的多蛋白血浆颗粒有可能通过其金属携带和储运功能参与双壳贝类金属代谢过程。

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一株BDE-209降解菌的筛选及其降解特性

范罗圣, 吴　涓, 胡丁璠

生物学杂志 2023, 40 (3): 41-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.041

摘要（124）

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为探究细菌对十溴联苯醚（BDE-209）的生物降解特性，从活性污泥中分离出一株有效降解BDE-209的好氧细菌——硝基还原假单胞菌（Pseudomonas nitroreducens）。研究该菌降解BDE-209 的最适外加碳源，探索P.nitroreducens细胞表面特性在不同BDE-209初始质量浓度下的变化及降解动力学特征。结果表明，P.nitroreducens能够以BDE-209为唯一碳源生长。葡萄糖对BDE-209生物降解的促进作用最为显著，当葡萄糖质量浓度为250 mg/L时，对10 mg/L BDE-209的降解率可达76.2%。BDE-209的降解动力学符合准一级动力学方程，半衰期短、降解速率较快，且P.nitroreducens对较高质量浓度的BDE-209具有良好的耐受性。高质量浓度的Cu2+（≥30 mg/L）会抑制BDE-209的降解和菌株的生长。P.nitroreducens的高细胞表面疏水性使BDE-209更容易进入细胞内部，细胞膜通透性的增加是受到BDE-209的应激作用所致。微生物降解是一种将BDE-209从污染环境中清除的有效修复技术，从环境中筛选出高效降解菌为BDE-209的生物降解提供了更多可能性。

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TRPM2基因敲除小鼠的建立与鉴定

王存连, 李龙飞, 张瑞华, 徐明举, 徐　彤

生物学杂志 2023, 40 (4): 114-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.04.114

摘要（111）

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利用CRISPR/Cas9技术构建瞬时受体电位M2（TRPM2）基因敲除的杂合子小鼠模型。参考Ensembl数据库中Trpm2-203的内含子2和内含子24序列选择sgRNA靶点并进行体外合成。通过体外转录方式获得Cas9 mRNA，将其与sgRNA显微注射至C57BL/6J小鼠的受精卵后，移植到假孕母鼠的输卵管内，获得F0代小鼠。阳性F0代小鼠分别与野生型C57BL/6J小鼠交配获得F1代。结果显示，经PCR产物测序共获得3只阳性F0代小鼠；阳性F0代小鼠分别与野生型C57BL/6J小鼠交配获得4个品系，共获得27只阳性F1代小鼠。通过实时荧光定量PCR和Western Blot方法验证，表明研究成功构建TRPM2基因敲除杂合子小鼠(TRPM2+/-)，为下一步开展TRPM2基因及其表达产物的生物功能研究提供良好的动物模型。

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线粒体蛋白HIGD1A调控细胞自噬增强HeLa细胞辐射抗性

赵喜朋, 赵国平

生物学杂志 2023, 40 (5): 11-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.05.011

摘要（117）

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为探究线粒体蛋白HIGD1A通过调控自噬增强宫颈癌细胞（HeLa）辐射敏感性的机制，以对照细胞和HIGD1A敲低的HeLa细胞为研究对象，利用自噬诱导剂Earle’s 平衡盐溶液（EBSS）和电离辐射处理细胞，Western Blot检测细胞自噬标志蛋白LC3、P62的表达水平，并检测Ad-mCherry-GFP-LC3B重组腺病毒感染细胞的荧光表达水平；CCK-8检测氯喹/雷帕霉素预处理2 h，并在辐照处理之后48 h的细胞活力；Western Blot检测雷帕霉素处理之后的caspase-7和cleaved caspase-3蛋白表达水平。结果显示：与对照细胞相比，敲低HIGD1A抑制EBSS和电离辐射处理之后LC3的生成、P62的降解和mCherry-GFP-LC3黄色斑点、红色斑点的生成；CCK-8检测结果发现，敲低HIGD1A并结合氯喹处理降低了细胞在电离辐射处理之后的细胞活力；此外，敲低HIGD1A显著增加了肿瘤细胞中caspase-7和cleaved caspase-3蛋白表达水平，在雷帕霉素处理后HIGD1A敲低细胞中仍存在较高的凋亡水平。结果表明，HIGD1A通过自噬途径参与调节肿瘤细胞的辐射敏感性。

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天然橡胶加工废水中异养硝化好氧反硝化菌株的筛选及脱氮特性

惠　昊, 李娟娟, 李　宏, 唐燕琼, 彭姝璐, 燕锡尧, 张　英, 刘　柱

生物学杂志 2023, 40 (3): 56-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.056

摘要（80）

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从天然橡胶加工废水中分离筛选出一株异养硝化好氧反硝化菌株JD-7，再根据16S rDNA序列和形态学特征初步鉴定该菌株为芽孢杆菌属。菌株JD-7在48 h内能将水体中氨态氮质量浓度从最初的98.24 mg/L降到8.33 mg/L，去除率达到91.52%，并且菌株同时具有去除硝态氮和亚硝态氮的能力，去除率分别达到44.39%和50.06%。通过响应面实验方法探究菌株不同影响因子（温度、初始pH值、碳氮比）下脱氮能力。结果显示，在温度为30.35 ℃、初始pH值为7.85、碳氮比为6.13的条件下，脱氮能力最强。将菌株投入到不同比例的实际废水进行小试实验确定菌株的实际应用效果，在最优条件下JD-7对实际天然橡胶加工废水的氨氮去除速率可达到131.48 mg/(L·d)。研究表明，菌株JD-7具有较高的脱氮能力，在天然橡胶加工废水处理中具有巨大的应用潜力。

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细叶远志皂苷调控PPARγ/PGC-1α信号通路保护D-半乳糖协同Aβ1-42损伤的HT-22细胞

李从婷, 朱国旗, 陈　彦, 瞿　艳, 卞志娟, 王训翠

生物学杂志 2023, 40 (3): 16-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.016

摘要（110）

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以D-半乳糖协同Aβ1-42诱导HT-22细胞损伤建立AD体外模型，旨在研究PPARγ/PGC-1α信号通路在D-半乳糖协同Aβ1-42诱导HT-22细胞损伤中的作用及细叶远志皂苷的干预机制。采用MTT法检测细胞存活率；台盼蓝染料排斥实验检测细胞死亡率；β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况；Mito-Tracker 荧光标记观察线粒体损伤程度；罗丹明123染色流式细胞仪检测线粒体膜电位变化；比色法检测超微量总ATP酶含量改变；Western Blot法检测PPARγ、PGC-1α、COX-2和NF-κB蛋白的表达；ELISA法检测炎性因子TNF-α和IL-6的含量。结果显示，与模型组相比，细叶远志皂苷(10、20、40 μmol/L)能显著提高D-半乳糖协同Aβ1-42诱导的HT-22细胞存活率，降低β-半乳糖苷酶阳性表达，增加细胞内ATP酶活性，阻止线粒体膜电位下降，抑制炎症因子TNF-α和IL-6水平的增加，下调NF-κB和COX-2蛋白的表达同时上调HT-22细胞中PPARγ、PGC-1α蛋白的表达。结果提示细叶远志皂苷在一定剂量范围内对D-半乳糖协同Aβ1-42损伤的HT-22细胞具有保护作用，其保护机制可能与上调PPARγ/PGC-1α信号通路、增强线粒体能量代谢、阻止炎症反应有关。

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柞蚕ApMLEC的重组表达和功能分析

刘智超, 古苏云, 刘丹梅, 范　琦, 刘宇博, 张嘉宁, 李文利

生物学杂志 2023, 40 (3): 22-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.022

摘要（109）

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对柞蚕Malectin（ApMLEC）进行克隆、蛋白表达纯化和初步功能分析。基于已知的柞蚕cDNA数据库，通过PCR克隆ApMLEC基因，生物信息学分析序列信息；将基因连接至pET-28a原核表达载体，通过大肠杆菌BL21（DE3）表达系统和亲和层析法纯化重组蛋白，探究该蛋白结合多糖、凝集细菌和抑菌能力；通过将基因连接至转移载体pApBacDual-egfp探究其抗病毒作用。结果表明：基因由798个碱基构成，编码266个氨基酸，纯化得到分子质量约为33 ku、带有组氨酸标签的重组蛋白；ApMLEC能够与麦芽糖、脂多糖、肽聚糖结合；凝集细菌；抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长，且最小抑菌质量浓度均为250 μg/mL；并抑制ApNPV病毒的复制。ApMLEC初步功能分析结果表明其可能在柞蚕天然免疫中发挥重要作用，为今后开展柞蚕免疫系统的研究奠定基础。

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hdac8基因敲除对斑马鱼运动能力的影响

罗贝贝, 罗军涛, 韩丽洁, 韩兵社, 张俊芳

生物学杂志 2023, 40 (3): 74-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.074

摘要（116）

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为研究鱼类hdac8的生物学功能，以斑马鱼（Danio rerio）作为模式生物，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，针对hdac8基因的第3个外显子设计Cas9靶位点，并制备gRNA。将gRNA与Cas9蛋白显微注射至一细胞期的斑马鱼胚胎中。经过T7E1核酸内切酶酶切、测序和序列比对后确定hdac8敲除成功，进一步获得F2代缺失41个碱基对的hdac8的纯合突变体斑马鱼。RT-qPCR结果显示：与WT斑马鱼相比，hdac8-/-斑马鱼的hdac8mRNA表达量显著下调（P<0.0001）；而hdac1的mRNA的表达量补偿性增加（P<0.05），hdac3的mRNA表达水平无显著性差异。Western Blot显示hdac8-/-斑马鱼全鱼和肌肉组织中H3K27ac、H3K9me3、H3K4me3和H3K4me1的表达水平都没有发生显著变化。斑马鱼行为轨迹跟踪系统检测发现，与WT斑马鱼幼鱼相比，hdac8-/-斑马鱼幼鱼的最大加速度无明显差异，但运动总距离、平均速度、活动性均显著性降低（P<0.0001），说明敲除hdac8基因会对斑马鱼幼鱼的运动能力造成影响。

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苦驴河上游小流域水源涵养技术与效果评估

耿　明, 李玉成, 窦月芹, 张学胜, 李永慧, 周　敏, 沈　雨

生物学杂志 2023, 40 (3): 113-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.113

摘要（82）

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基于水资源现状，对苦驴河流域内水土流失产生的氮、磷污染进行监测，利用植物篱拦截、秸秆覆盖、坡面改造结合有机肥替代与沟塘水葫芦拦截技术组合对林坡地水土流失控制和清洁产流，促进水资源在系统内部循环，为该地区水土流失治理提供参考。结果表明：研究区不同土地利用类型下土壤养分含量和流失量差异明显，且氮磷流失形态均以吸附态为主，经济林地总氮（total nitrogen，TN）与总磷（total phosphorus，TP）的流失量分别为0.482 t/(km2·a)和0.117t/(km2·a)；组合措施能有效降低林坡地径流57.32%的悬浮物（suspended solids，SS）、45.97%的TN和38.93%的TP含量，可增加土壤有机质50.06%，提升土壤含水率39.94%；经济林地土壤养分含量和流失量最高，增加水田用地方式或可以改善该地区水土流失；组合措施有效削减水土流失造成的泥沙侵蚀，TN、TP和SS含量并改善土壤，提高保水能力。

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覆土细菌在食用菌栽培中的作用

奚莉萍, 胡晨梦卉, 李彩红, 郭　婷, 鲍大鹏, 杨瑞恒

生物学杂志 2023, 40 (3): 101-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.101

摘要（105）

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针对食用菌在栽培过程中覆土细菌的作用，重点介绍需要覆土栽培的食用菌种类、不同食用菌覆土的细菌结构组成、动态变化、生物功能以及覆土细菌与食用菌互作的分子机制等。在此基础上，总结并展望覆土微生物组的研究方向、存在问题以及解决办法，为深入研究细菌与食用菌互作分子机制提供参考，同时也为研发食用菌生长促进剂以提高食用菌栽培效益、生物防治剂控制虫害和疾病等提供思路。

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绿色分离纯化生产高纯度维生素K₂

马国良, 郑之明, 王　鹏, 王　丽, 赵根海, 王　晗

生物学杂志 2023, 40 (3): 107-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.107

摘要（153）

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为克服维生素K2（Vitamin K2, VK2）提取工艺有毒溶剂用量大、有毒物质残留等缺点，建立一种高纯度VK2绿色分离纯化工艺方法。使用天然油剂与甲醇、乙醇等有机试剂分别萃取纳豆芽孢杆菌干菌体内的VK2，结果表明，中链甘油三酯的萃取效果最好，最大提取量为2.7 mg/g。通过使用7种不同型号的大孔树脂分离中链甘油三酯溶剂相中的VK2，以及利用静态吸附与解吸附实验，筛选出最优型大孔树脂HC-200S。进一步优化大孔树脂的动态吸附和解吸附工艺，并且绘制大孔树脂的动态解吸附曲线，结果表明：上样液吸附流速为2.0 mL/min、解吸剂为无水乙醇/乙酸丁酯(1∶2,体积比）的混合溶液、解吸剂流速为1.0 mL/min时，HC-200S型大孔树脂对VK2的吸附和解吸附效果最佳；VK2纯度较纯化前提升4倍，达到87.8%，回收率达到93.1%。将树脂分离纯化得到的VK2解吸液经过冷冻结晶和溶剂挥发结晶，分别得到纯度为96.7%和97.1%的VK2晶体。研究将为VK2的工业生产和绿色分离纯化提供方法依据，同时也为其他脂溶性维生素的分离纯化提供借鉴。

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多菌种固态发酵玉米皮制备菌体蛋白饲料

高俊杰, 燕亚平, 李永丽, 刘占英

生物学杂志 2023, 40 (3): 91-. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.03.091

摘要（125）

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以发酵和淀粉制糖工业产生的高粗纤维含量玉米皮为原料，通过多菌种固态发酵，降低玉米皮中粗纤维含量，增加发酵产物中蛋白含量，制备菌体蛋白生物发酵饲料。根据底物特点和产物目标选择适宜菌种进行发酵组合，采用单因素试验设计探究菌种比例、接种量、发酵方式、糖蜜含量及氮源种类对发酵产物中粗蛋白、真蛋白和粗纤维的影响。结果表明：最佳菌种比例为枯草芽孢杆菌CGMCC 1.7417∶枯草芽孢杆菌CICC 10090∶酿酒酵母CICC 32236 ∶产朊假丝酵母 CGMCC 2.2878等于1∶1∶2∶2；种子液接种量为15%；最佳发酵方式为浅盘发酵；最佳糖蜜含量为10°Brix；最佳氮源种类为硫酸铵。玉米皮经多菌种固态发酵后，粗蛋白含量为21.38%，提升率32.47%；真蛋白含量为10.77%，提升率50.42%；粗纤维含量为17.78%，降低率14.19%。

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