生物学杂志 ›› 2023, Vol. 40 ›› Issue (1): 16-.doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2023.01.009
陈丽媛1, 梁 杏2, 彭琪惠2, 李奕恒2, 叶春婷2,3, 徐丽明1
CHEN Liyuan1, LIANG Xing2, PENG Qihui2, LI Yiheng2, YE Chunting2,3, XU Liming1
摘要: 基于胶原蛋白的蛋白酶耐受性,建立变性胶原蛋白的定量分析方法。制备6组已知含量比的变性/非变性胶原蛋白混合样品,在液态胶原pH值约2.0的条件下,添加胃蛋白酶对样品中的变性胶原蛋白进行酶切,使其成为短肽,胃蛋白酶与胶原蛋白的质量比为1∶5,温度为30 ℃,消化24 h;然后采用NaCl沉淀法(NaCl终浓度为2 mol/L)对样品中的非变性胶原蛋白进行沉淀回收,并通过羟脯氨酸测定法检测其含量比。结果显示,6组样品中非变性胶原蛋白的回收率为89.96%~99.24%,表明本方法可以充分酶解变性胶原蛋白,而非变性胶原蛋白得以沉淀回收,可用于定量分析液态或海绵状、粉末状等酸溶性胶原蛋白原料和产品中变性胶原蛋白的含量比。
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