生物学杂志

生物学杂志 ›› 2019, Vol. 36 ›› Issue (5): 21-.doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2019.05.021

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一种高亲和结合I型胶原蛋白的GST融合蛋白表达分析

  

  1. 1. 西南交通大学 生命科学与工程学院， 成都 610031； 2. 西南交通大学 材料科学与工程学院， 
    成都 610031； 3. 南华大学 药学与生命科学学院， 衡阳 421001
  • 出版日期:2019-10-18 发布日期:2019-10-11
  • 通讯作者: 李遂焰，副教授，研究方向为天然药物物质基础及体内代谢, E-mail：lisuiyan@swjtu.edu.cn；陈渝萍，教授，研究方向为肝纤维化的分子病理和治疗，E-mail：yupingc@swjtu.edu.cn
  • 作者简介:董育红，硕士研究生，研究方向为天然药物物质基础及体内代谢，E-mail：510272679@qq.com
  • 基金资助:
    国家自然科学基金（81371675）

A GST fused protein expression with high affinity for type I collagen

  1. 1. School of Life Science and Engineering, Southwest Jiaotong University； 2. School of Materials Science and Engineering, Southwest Jiaotong University, Chengdu 610031; 3.School of Pharmaceutis and Life Sciences, University of South China, Hengyang 421001, China
  • Online:2019-10-18 Published:2019-10-11

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摘要： 鉴于纤维化疾病病人组织中I型胶原的异常沉积和人胎盘生长因子2氨基酸123~144肽段（PlGF-2123-144）对I型胶原蛋白出众的高亲性，尝试制备PlGF-2123-144短肽用于改善抗纤维化药物的组织靶向特异性。首先对该短肽的编码DNA序列进行修改和扩增，构建了GST-PlGF-2123-144融合蛋白的原核表达质粒；进而使用E.coli BL21诱导表达该融合蛋白，并以谷胱甘肽琼脂糖纯化后透析；最后采用ELISA检测确定，经原核表达和纯化所获得的GST-PlGF-2123-14融合蛋白具备对I型胶原蛋白的高亲性。为研发特异性靶向纤维化组织的抗纤维化药物打下了可靠基础。

关键词: font-size:medium, ">I型胶原蛋白；PlGF-2123-144；GST融合蛋白；原核表达

Abstract: Given that type I collagens dominate among ECMs aberrantly accumulated in fibrotic tissues, we consider to adopt the excellent affinity of the peptide of human PlGF-2 (aa. 123-144) for type I collagens to improve tissue targeting specificity of antifibrotic agents. We firstly modified the DNA coding sequence of peptide PlGF-2123-144 and constructed GST-PlGF-2123-144 prokaryotic expression plasmid. GST-PlGF-2123-144 fused proteins were then expressed in E. coli BL21, affinity purified with glutathione sepharose 4B matrix and PBS dialyzed. High affinity for type I collagen of these prepared GST-PlGF-2123-144 fused proteins was finally confirmed with ELISA assay. Our work contributes to the development of anti-fibrotic drugs that specifically target fibrotic tissue.

Key words: type I collagen, PlGF-2123-144, GST fused protein, prokaryotic expression

中图分类号: