生物学杂志

生物学杂志 ›› 2019, Vol. 36 ›› Issue (5): 7-.doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2019.05.007

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CRISPR/Cas9系统介导的斑马鱼kctd1纯合突变体的构建

  

  1. 1. 海洋生物科学国际联合研究中心(上海海洋大学)中国科学技术部， 上海 201306；2. 水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室(上海海洋大学)， 上海 201306；3. 水产科学国家级实验教学示范中心(上海海洋大学)， 上海 201306

  • 出版日期:2019-10-18 发布日期:2019-10-11
  • 通讯作者: 任建峰，副研究员，硕士生导师，研究方向为斑马鱼器官发育调控，E-mail：jfren@shou.edu.cn
  • 作者简介:刘姣，硕士研究生，研究方向为发育生物学，E-mail：976017362@qq.com
  • 基金资助:
    上海市科委国际科技合作项目(15410723300)；上海海洋大学博士启动基金(A2-0203-00-100318)

Construction of kctd1 homozygous mutants in zebrafish via CRISPR/Cas9 system

  1. 1. International Research Center for Marine Biosciences, Ministry of Science and Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306; 2. Key Laboratory of Exploration and Utilization of Aquatic Genetic Resources, Ministry of Education, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306； 3. National Demonstration Center for Experimental Fisheries Science Education, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China
  • Online:2019-10-18 Published:2019-10-11

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摘要： KCTD1(potassium channel tetramerization domain containing 1)属于钾离子通道四聚化结构域蛋白基因家族的成员，该家族成员的N端具有保守的BTB(Bric-a-brack, Tram-track, Broad complex)结构域和一个钾离子四聚体通道结构域(K-ketra)，但C端是多变的。人类KCTD基因家族成员的突变和表达异常与多种疾病相关。研究选取人类皮肤-耳朵-乳头综合征(Scalp-Ear-Nipple Syndrome，SEN)致病基因KCTD1在斑马鱼(Danio rerio)中的直系同源基因kctd1，利用CRISPR/Cas9技术进行基因敲除，通过F1剪尾检测和F1内交，成功获得kctd1 F2纯合突变体。获得的突变体类型为+7 bp和-8 bp。研究结果对于人类KCTD1基因功能以及KCTD1致病机理的研究具有参考价值。

关键词: 斑马鱼, KCTD1, 突变体, CRISPR/Cas9

Abstract: KCTD1(potassium channel tetramerization domain containing 1) is one of the members of the potassium channel tetramerization domain containing gene family. The proteins in the gene family possess conserved domains including BTB/POZ domain and K-ketra at the N-terminal, and a variable C-terminal. Mutations and improper expression of human KCTD genes are associated with a variety of diseases. We knocked out the kctd1 gene, the orthologue of human KCTD1, mutation of which caused SEN syndrome in zebrafish(Danio rerio) via CRISPR/Cas9. Two types of homozygous mutants +7 bp and-8 bp were obtained after heterozygous F1 screening and F1 in-cross. This research is of great significance for studying the function of KCTD1 gene and the pathogenesis of KCTD1.

Key words: zebrafish, KCTD1, mutants, CRISPR/Cas9

中图分类号: