混合培养基模式培养杂交瘤细胞表达单克隆抗体
- 1. 汕头大学 医学院， 汕头 515041；2. 中国科学院过程工程研究所 生化工程国家重点实验室， 北京 100190
Monoclonal antibodies production by hybridoma cell culture based on mixed medium model
- 1. Medical College, Shantou University, Shantou 515041; 2. National Key Laboratory of Biochemical Engineering, Institute of Process Engineering, Chinese Academy of Science, Beijing 100190, China.
摘要： 采用混合培养基模式将杂交瘤细胞进行减血清悬浮驯化培养，通过优化提高单克隆抗体的表达量，并进行抗体的分离纯化。在杂交瘤细胞悬浮培养优化过程中，最终确定的血清浓度为2%胎牛血清，培养基配比为RPM1640∶ SFM4CHO∶ OptiCHO（4.5∶ 4.5∶ 1），接种密度为3×105cells/mL，采用批次补料流加培养，每2 d流加1次，每次流加量为初始体积的3%，抗体的表达量从原始的84 mg/L提高到168 mg/L。将其进一步在5 L搅拌式生物反应器中进行培养，离心后上清经protein A亲和层析纯化，确定抗体的产量为240 mg/L。