摘要: 于结构信息及保守序列比对,通过半理性设计和高通量筛选,将来源于Pseudomonas putida的NADPH依赖型谷氨酸脱氢酶PpGDH改造为NADH依赖型。与原始PpGDH相比,突变体PpGDH-D264V对NADH的偏好性(Ratio of kcat/Km)增强了1 607倍,并具有对多种酮酸底物的催化活力,可用于制备多种非蛋白质氨基酸。对PpGDH-D264V进行酶学性质表征,其最适温度为45 ℃,最适pH值8.0,T10 min1/2温度达到58.1℃,在中性及弱碱性环境下具备良好的稳定性,为后续应用奠定基础。
中图分类号:
陆利兵, 周海胜, 吴坚平, 杨立荣. NADPH依赖型谷氨酸脱氢酶的辅酶特异性改造[J]. 生物学杂志, 2021, 38(6): 31-.
LU Libing, ZHOU Haisheng, WU Jianping, YANG Lirong. Coenzyme specific modification of NADPH-dependent glutamatedehydrogenase[J]. Journal of Biology, 2021, 38(6): 31-.