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当期目次

    2022年, 第39卷, 第1期 刊出日期:2022-02-18 上一期   
    特约综述
    溶酶体与神经退行性疾病
    曲莉丽, 仓春蕾
    2022 (1):  1.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 001
    摘要 ( 2177 )   PDF  
    溶酶体是真核细胞内发挥降解功能的主要细胞器,它的功能异常与多种疾病密切相关。综述溶酶体与神经退行性疾病相关的研究进展,并重点从溶酶体酶、溶酶体pH 调控和V-ATPase、溶酶体膜蛋白、溶酶体的细胞内定位等方面阐述溶酶体功能异常与神经退行性疾病的关系,为理解神经退行性疾病的机制提供新的视角,同时展望以溶酶体为靶点进行神经退行性疾病治疗和药物开发的广阔前景。
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    研究报告
    慢病毒介导SHCBP1 低表达对黑色素瘤B16细胞增殖的影响
    孙志阳, 冯 光, 雷静静, 唐铖铖, 孙晨皓, 王 令, 路宏朝
    2022 (1):  11.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 011
    摘要 ( 1592 )   PDF  
    构建Shcbp1 慢病毒干扰载体,探究SHCBP1 在黑色素瘤B16 细胞中的生物学功能。通过设计靶向干扰小鼠Shcbp1 基因的shRNA-1 和shRNA-2 以及对照序列shRNA-NC,连接至慢病毒骨架载体,利用HEK293T 细胞包装慢病毒颗粒,侵染B16 细胞,检测干扰效率,并通过CCK-8 和流式细胞术检测细胞活力和细胞周期。利用WesternBlot 检测增殖相关基因的表达。结果显示:敲低Shcbp1 显著抑制B16 细胞增殖;流式细胞术检测结果发现,敲低Shcbp1 将B16 细胞阻滞在 G1 期;ERK1/2 的磷酸化水平降低,P21 的表达水平升高。结果表明SHCBP1 可能通过ERK1/2 信号通路抑制P21 的转录,加速B16 细胞从G1 到S 期进程。
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    PelA-Expansin 融合蛋白原核重组表达研究
    魏玲玲, 叶凯霞, 李嘉欣, 赵庆新
    2022 (1):  17.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 017
    摘要 ( 1212 )   PDF  

    扩张蛋白(Expansin)具有削弱细胞壁多糖之间氢键,增强多糖降解酶降解多糖的效率。在食品领域、生物能源领域和生物制药领域,具有广泛的应用价值。自然状态下,Expansin 蛋白在植物、真菌、细菌等生物中的表达量较少,目前,枯草芽孢杆菌Expansin 重组表达研究受到广泛关注。以来源于构巢曲霉的果胶酸裂解酶(PelA)为融合标签,构建高效表达融合蛋白PelA-Expansin 的工程菌newexpansin / pelA-pET-28a(+) / BL21(DE3),在OD600 为0. 4、0. 01 mmol/ L IPTG、15 ℃和150 r/ min 下,表达24 h,融合蛋白产量约为3. 0 mg/ mL。建立融合蛋白一次性Histag亲和纯化工艺,工艺中上样、清洗和洗脱缓冲液中咪唑浓度分别为30、 60 和 500 mmol/ L,目标蛋白纯度约为95%,得率约为75%;融合蛋白协同纤维素酶、木聚糖酶和果胶酸水解酶酶降解多糖的效率分别为300%、150%和125%;为扩张蛋白Expansin 在食品、能源、医药及农业等领域的应用奠定了基础。



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    基于RNA-seq 的脂代谢相关基因Tmem176a 功能分析
    崔茂生, 段维旺, 李晓宁, 汤 晨, 李 凯, 周宇荀, 肖君华
    2022 (1):  21.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 021
    摘要 ( 1108 )   PDF  

    探讨在Hepa1-6 细胞中过表达、敲低Tmem176a 基因对脂质代谢途径的影响。将构建成功的Tmem176a 慢病毒过表达载体、siRNA 分别转染进Hepa1-6 细胞中,将过表达或敲低Tmem176a 后的Hepa1-6 细胞进行RNA-seq、生物信息学分析、Real-Time PCR 验证。与对照组相比,Tmem176a 在Hepa1-6 细胞中过表达182 倍(P<0. 05)和敲低0. 2 倍(P<0. 05),OE-Tmem176a 相较于OE-Vector 差异表达基因共计424 个,其中下调基因192 个,上调基因共233 个;KD- Tmem176a 相较于KD-Scramble 差异表达基因共计405 个,其中下调基因248 个,上调基因共157 个,部分差异基因富集在脂肪的消化吸收、胆固醇代谢、甘油酯代谢、脂肪酸合成等代谢途径,Real-Time PCR 验证部分差异表达的基因,差异基因表达水平的变化趋势与RNAseq 一致。RNAseq 结果提示Tmem176a 基因会影响脂质代谢基因响应Tmem176a 表达水平改变会促进小鼠肝癌Hepa1-6 细胞中脂质代谢基因表达水平发生显著变化。


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    大肠杆菌fliC 基因失活突变株的构建及其特征
    赵行行, 程玉梅, 陈 娴, 崔古贞, 齐晓岚, 洪 伟
    2022 (1):  27.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 027
    摘要 ( 1274 )   PDF  

    构建编码大肠杆菌鞭毛蛋白基因(fliC)失活突变株,并探究其生物被膜形成改变后在应激状态下的生物学特征。使用Thermotargetron 靶向基因失活系统,构建fliC 基因失活突变株(ΔfliC420s),测定ΔfliC420s 与野生型菌株的生长速率、运动能力、生物被膜形成能力、自溶速率、pH 敏感性及对抗生素耐受性的变化。ΔfliC420s 相比野生型菌株,生长速率未受影响,在半固体培养基中运动能力缺失,生物被膜形成能力明显降低,菌体自溶速率加快,pH 敏感性增强,以及对D-环丝氨酸、红霉素、诺氟沙星的耐受性降低。大肠杆菌fliC 基因在细菌生物被膜形成和对外界压力的抵抗中具有重要作用。


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    蝎毒素抗菌肽La39 的序列分析及功能鉴定
    朱晨刚, 贾 庭
    2022 (1):  33.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 033
    摘要 ( 1546 )   PDF  

    从中国海南省采集澳链尾蝎(Liocheles australasiae),构建蝎毒腺cDNA 文库,筛选得到一条抗菌肽基因La39,其成熟肽由18 个氨基酸组成,二级结构呈现为α-helix,亲水和疏水氨基酸位于分子的对立面,形成较强的两性拓扑结构。MICs 测定实验、溶血实验和抑制菌株生长实验结果表明,La39 对金黄色葡萄球菌的最小抑制质量浓度为50 μg/ mL,对大肠杆菌无抑制活性,有溶血活性。


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    贝莱斯芽孢杆菌对花生白绢病的防治效果
    潘梦诗, 郭文阳, 张宗源, 岳丹丹, 亓兰达, 王雪妍, 张英涛
    2022 (1):  37.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 037
    摘要 ( 1733 )   PDF  

    贝莱斯芽孢杆菌作为最新发现的潜力生防菌,通过平板对峙试验、生防机制初探和盆栽试验,研究其对花生白绢病的防治效果。平板对峙试验结果表明,贝莱斯芽孢杆菌可显著抑制花生白绢病的生长,菌丝生长抑制率达81. 93%,破坏病菌菌丝结构,抑制菌核的生成。对贝莱斯芽孢杆菌的生防机制进行初探,贝莱斯芽孢杆菌可产生蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶和嗜铁素,其无菌发酵滤液具有显著的拮抗作用。盆栽试验结果显示,经菌液处理后均能抑制花生白绢病的发生,降低花生病情指数,对花生的生长有一定的促进作用,以接种病菌2 d 后喷洒菌液的处理效果最优,防治效果可达66. 15%。贝莱斯芽孢杆菌可用于花生白绢病的防治,具有良好的生防前景


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    两株锈菌重寄生菌毒素的分离鉴定及活性研究
    李 靖, 谢 津, 孔 磊, 张登云, 隋国强, 陈玉惠
    2022 (1):  42.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 042
    摘要 ( 856 )   PDF  

    植物锈病防治非常困难,其生物防治重点集中在对其重寄生菌的研究方面。前期研究发现拟盘多毛孢(Pestalotiopsis kenyana)PG52 菌株和康宁木霉(Trichoderma koningii)8662 菌株对石楠叶锈病菌及茶藨生柱锈菌均有很强的重寄生作用,但其重寄生机制不清楚。采用活性追踪并结合传统天然产物化学的分离方法,首次从两株重寄生菌中分离得到两种对锈孢子有致死作用的毒素分子———3-硝基丙酸和柠檬酸。两种毒素分子均能使锈孢子细胞

    膜的通透性发生改变,内含物外溢,被作用的锈孢子和对照相比明显变小,台盼蓝染色证实锈孢子死亡。分别用10 μg/ mL 的3-硝基丙酸和100 μg/ mL 的柠檬酸处理1 h,茶藨生柱锈菌的锈孢子致死率达到50%,当柠檬酸的质量浓度达到500 μg / mL 时,锈孢子的致死率达到90%。500 μg/ mL 的柠檬酸同时对石楠叶锈(Aecidium wenshanense)锈孢子、竹杆锈(Sterostratum corticioides)冬孢子和三叶草叶锈(Uromyces trifolii)夏孢子具有致死作用。实验结果为

    重寄生机理的阐明和生物农药的开发奠定基础。


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    多环芳烃降解菌的筛选及降解特性分析
    甄 静, 李 磊, 王继雯, 杨文玲, 杜志敏, 李亮亮, 巩 涛
    2022 (1):  46.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 046
    摘要 ( 357 )   PDF  

    为了获得耐受各种不良环境的多环芳烃(PAHs)降解菌,利用多环芳烃(菲和芘)、重金属(Cu2+ 、Cr6+ )以及氮源缺乏培养基从南阳石油污染土壤中分离筛选一株耐受不良环境的菲芘降解菌,通过形态学特征和分子生物学方法鉴定菌株,并研究菌株对重金属Cr6+和Cu2+ 、氮源缺乏及酸碱的耐受程度,进一步探究在这些不良环境下菌株对多环芳烃菲和芘的降解效果。结果表明,菌株属于根瘤菌属,命名为F3-1。在液体培养基中,菌株F3-1 对重金属Cr6+

    和Cu2+的耐受质量浓度均为20 mg/ L;在氮源缺乏的情况下,菌株能够正常生长;菌株F3-1 在pH 5. 0 和pH 7. 4环境下均可以正常生长;菌株F3-1 在不良环境下对多环芳烃菲和芘均有很好的降解效果,5 d 后在pH 7. 4 条件下对菲(50 mg/ L)的降解率为35. 54%,在pH 5. 0 条件下对芘(50 mg/ L)的降解率为53. 43%。


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    大腹园蛛重组嵌合蛛丝蛋白:一种高分子量的生物材料
    贾秋品, 孟 清
    2022 (1):  51.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 051
    摘要 ( 286 )   PDF  

    基于大腹园蛛的两种蛛丝基因构建三部分嵌合的重组蛛丝蛋白iN7RC,在大肠杆菌中成功表达,通过纯化得到产量为34 mg/ L 的高纯度分子质量高达165. 2 ku 的重组蛛丝蛋白。不同pH 值下的圆二色谱分析显示iN7RC蛋白质的二级结构组分中的α-helix 结构占比随着pH 值的降低明显减少。通过手工牵拉的方式获得具有高强度和高延展性的重组蛛丝纤维,为蛛丝仿生材料的广泛应用奠定基础。


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    仿生矿化角蛋白多孔材料的制备及性能研究
    季 吉, 陈 光, 李丽丽, 袁久刚, 苑 超, 王 平, 许 波
    2022 (1):  57.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 057
    摘要 ( 214 )   PDF  

    为了解决纯角蛋白多孔材料力学性能差的问题,利用巯基-烯点击化学反应制备聚乙二醇二甲基丙烯酸酯(PEGDMA)改性角蛋白,在此基础上,将改性角蛋白与海藻酸钠(SA)共混得到角蛋白多孔材料,并利用交替矿化法对多孔材料进行仿生矿化,最终制备了仿生矿化角蛋白多孔材料。红外(FTIR)测试显示,PEGDMA 成功接枝到角蛋白上,经过改性的角蛋白,其多孔材料弹性得到明显提高。扫描电子显微镜(SEM)、红外以及X 射线衍射(XRD)测试结果均显示,HAP 成功沉积于多孔材料表面,多孔材料表面形貌变得粗糙。经过矿化,角蛋白多孔材料性能得到全面提升,其屈服点应力达到3. 1 MPa,生物相容性提升至117. 86%,对Cu2+ 的吸附量高达159. 0 mg/ g。这对拓展角蛋白多孔材料的应用具有较好的启示意义。


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    乌拉尔甘草CIPK 基因家族鉴定与表达分析
    仙亚杰, 王 斐, 谢双全, 陈喜凤, 沈海涛, 李鸿彬
    2022 (1):  62.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 062
    摘要 ( 261 )   PDF  

    为挖掘乌拉尔甘草钙调磷酸酶B 互作蛋白激酶 (Calcineurin B like protein interacting protein kinase, CIPK)家族成员特征并预测其功能,利用生物信息学方法鉴定乌拉尔甘草CIPK 家族基因,并对其进行系统发育、基因结构、保守结构域及进化关系、表达特征等分析。从乌拉尔甘草基因组中鉴定获得22 个GuCIPK 基因,分布于19 个不同的染色体位置;氨基酸序列比对分析发现多数GuCIPK 都含有1 个Ser/ Thr 结构域、1 个NAF 结构域以及PPI 结构域;进化树分析结果显示,22 个GuCIPK 基因可分为5 个亚组。GuCIPK 基因的上游启动子中存在一些非生物胁迫和激素应答元件,推测GuCIPK 基因的功能发挥可能受不同信号的调控。根据组织特异性表达特征可将GuCIPK 分为Ⅰ~Ⅳ 4 个组,其中 Ⅱ 组中6 个GuCIPK 成员在根、茎和叶片中的表达量较高,Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ组的GuCIPK 成员在根、茎、叶组织中的表达相对较低。利用qRT-PCR 分GuCIPK 响应不同非生物胁迫的表达特征,结果表明:在盐、氧化、干旱、高温和低温胁

    迫下,GuCIPK 基因受到不同胁迫的诱导表达。结果为进一步探究GuCIPK 的功能和可能的调控机制提供了一定参考。


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    不同生境密蒙花光合生理特性及光合曲线最适模型
    陈兰英, 肖 娟
    2022 (1):  69.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 069
    摘要 ( 191 )   PDF  

    以川东北丘陵地区林内(生境Ⅰ)、林窗(生境Ⅱ)和林缘(生境Ⅲ)下的密蒙花(Buddleja officinalis Maxim.)为研究对象,测定其盛花期株高、基径、花序长、叶面积、黄酮类化合物含量和叶片叶绿素含量、光响应曲线及光合日变化,分析密蒙花对不同生境的适应性,运用5 个常用模型对3 个生境下的密蒙花光响应曲线进行拟合对比,探讨适合用于拟合密蒙花光响应曲线的模型。研究结果表明:3 个生境中林窗的株高、基径、花序长和叶面积均显

    著高于林内和林缘生境林窗(P<0. 05),黄酮类化合物含量林窗显著高于林内和林缘,林内最低(P<0. 05);叶绿素a、叶绿素b 和总叶绿素含量林窗显著高于林内和林缘,林内最低(P<0. 05);光合日进程中,林内和林窗生境的净光合速率呈“单峰”曲线,林缘呈“双峰”曲线;5 个模型中直角双曲线修正模型为密蒙花光响应曲线最适拟合模型,在盛花期内,密蒙花林内、林窗和林缘饱和光强分别为1 424. 70、1 725. 76 和1 608. 85 μmol/ (m2·s),最大净光合速率分别为14. 07、17. 54 和16. 30 μmol/ (m2·s),光补偿点分别为26. 59、19. 08 和20. 89 μmol/ (m2·s),符合半阴性至半阳性植物的特点。林窗生境中的密蒙花光补偿点低,光饱和点高,对光适应的生态幅较宽。因此,密蒙花适宜种植在林窗生境下,如在林内生境中种植需及时调控乔冠层的透光率,在林缘中种植需要进行适度遮荫处理。


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    山茱萸环烯醚萜苷对小鼠血管内皮细胞的作用
    张 扬, 杨 靖, 高建萍, 陈 毅, 孔英俊, 夏磊磊, 张贵锋, 李勇超
    2022 (1):  75.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 075
    摘要 ( 192 )   PDF  

    对山茱萸环烯醚萜苷类(Cornus iridoid glycosides, CIG)成分进行提取、富集和鉴定,并探究其对血管内皮细胞增殖、形态和凋亡的影响。通过超声提取CIG 并经D101 大孔树脂去除色素和糖等影响检测的成分,CIG 提取物经HPLC-MS 检测并与标准品比对和鉴定。通过细胞增殖实验、激光共聚焦显微镜观察和细胞凋亡实验探究CIG对小鼠血管内皮细胞(b. end. 3)的影响。结果表明,0.5~50 μg/ mL CIG 可不同程度地促进血管内皮细胞增殖活性,抑制因高糖引起的细胞萎缩和凋亡。山茱萸作为药食同源的中药材可在一定程度上降低血栓形成的风险。


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    中国木蠹象属的种类及区系分析
    张新民, 韩 秀, 刘 霞, 熊忠平
    2022 (1):  80.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 080
    摘要 ( 194 )   PDF  

    木蠹象属Pissodes Germa 隶属于鞘翅目Coleoptera 象甲科Curculionidae。该属目前全世界已记录种类46种,分布于美洲的有29 种,分布在欧洲和亚洲有18 种,分布在中国的有8 种。木蠹象属的许多种类是针叶树的重要害虫,主要危害松树Pinus Linn、云杉Picea Dietr 和冷杉Abies Mill 等针叶树,是近年来中国西南地区发生较严重的林业病虫害之一。由于它们的寄主在中国分布广泛且危害非常严重,因此急需提高警惕,防止它们通过贸易渠道或人为携带等传入中国其他地区。对中国木蠹象的研究历史、寄主及分布进行系统总结,编制8 种的二项式检索表,分析其在世界动物地理界和中国动物地理区的分布特点,指出目前分类研究工作存在的问题,并展望研究前景。


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    光照强度对中缅树鼩行为、学习记忆和氧化应激的影响
    彭鸿碧, 贾 婷, 王政昆, 朱万龙
    2022 (1):  84.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 084
    摘要 ( 278 )   PDF  

    为探讨不同光照强度对中缅树鼩行为变化、学习记忆能力和氧化应激的影响,分别于光照628、1 256 和2 512 lx 条件下测定体重、摄食量、Y 型迷宫正确反应率和行为变化,并测定丙二醛(Malondialdehyde,MDA)浓度、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)和一氧化氮合酶(Nitric oxide synthase,NOS)浓度,以及SOD、AChE 和NOS 的活性。结果表明,第28 天时3 组之间体重差异显著,摄食量的变化趋势和体重变化相似。强光照明显降低中缅树鼩的取食行为,增加休息行为。第28 天时,不同光照强度组之间识别正确率差异极显著。不同光照强度对MDA、SOD 浓度和SOD 活性影响差异极显著,对NOS 和AChE 活性影响极显著。结果说明,强光照可以降低中缅树鼩的体重和取食行为,增加休息行为,可诱发中缅树鼩的认知障碍和脑组织内不同程度的氧化损伤。

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    综述与专论
    稳态磁场与药物联用对肿瘤细胞的生物学效应研究进展
    张 宁, 宋 超, 张翔飞, 李志元
    2022 (1):  89.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 05. 01. 089
    摘要 ( 199 )   PDF  

    稳态磁场对肿瘤具有抑制效应,与药物联用以提高药效的研究取得多项进展。系统分析稳态磁场联合常用药物如平阳霉素、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、紫杉醇、维生素D、辣椒素等对肿瘤细胞的生物学效应,发现特定强度的稳态磁场联合特定药物,可以显著降低药物的使用浓度和毒副作用,但对部分肿瘤具有拮抗作用或无明显影响。因此,稳态磁场与药物联用的生物学效应依赖于药物种类、磁场强度和细胞类型等。综述磁场与不同药物联用效应的研究进展,为临床上稳态磁场和药物联用提供参考。


    相关文章 | 计量指标
    硫化氢和脱落酸在植物响应逆境胁迫中的交互作用
    王加琪, 向汝华, 李忠光
    2022 (1):  94.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 094
    摘要 ( 222 )   PDF  

    硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)和脱落酸(Abscisic acid,ABA)是植物体内重要的信号分子和胁迫激素,二者能以独立或交互作用的方式,调控植物的生长发育及响应逆境胁迫。分析H2S 和ABA 在植物体内的代谢机制。总结H2S 和ABA 在植物响应干旱、高温、低温和渗透胁迫,以及调控气孔运动、种子萌发、根系生长等生理过程中的交互作用。阐述H2S 和ABA 交互作用的机理,为研究二者在植物生长发育及响应逆境胁迫中的交互作用奠定基础。总结并展望H2S 和ABA 交互作用的分子机理、H2S 与其他信号的交互作用、信号网络的新成员和信号组(Signalome)。


    相关文章 | 计量指标
    哺乳动物睾丸生物钟研究进展
    肖要要, 王逸群, 张林林, 潘 韬, 靳亚平, 陈华涛
    2022 (1):  99.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 099
    摘要 ( 218 )   PDF  

    结合已有文献报道和实验室前期积累,总结哺乳动物生物钟系统的分子调控机制和近20 年来生物钟在哺乳动物睾丸组织中的研究进展,提出哺乳动物睾丸生物钟存在的证据,阐述哺乳动物睾丸生物钟调控睾酮合成、精子发生等重要的生殖生理过程,并列举衰老、应激与有害化学物质等影响睾丸生物钟的重要因素。并就目前关于睾丸生物钟维持的调控机制及其影响其他生殖辅助细胞生理功能与特定时期精子发生的研究、组织特异性及条件性敲除小鼠模型的构建进行分析,以期深入揭示其分子机理,为从睾丸生物钟角度出发寻找提高睾酮水平及精子活力、高效发挥雄性种畜生殖潜力的靶位点提供新思路。


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    技术方法
    木瓜蛋白酶法制备抗氧化活性壳寡糖的工艺优化
    黄晓月, 毕思远, 区家豪, 孙力军, 陈斯琪, 房志家, 邓 旗, 邓义佳, 王雅玲
    2022 (1):  104.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 104
    摘要 ( 187 )   PDF  

    为明确高抗氧化活性壳寡糖制备的木瓜蛋白酶法工艺,以壳聚糖为原料,酶解产物的DPPH 自由基清除率和总还原力为检测指标,使用单因素试验探究酶底比、酶解温度、pH 值、酶解时间对酶解产物抗氧化活性的影响,确定最佳酶解条件为酶底比20%、酶解温度50. 00 ℃、pH 4. 80。在单因素试验的基础上,对酶解温度、酶解时间和pH值进行Box-Behnken 响应面设计并优化得到最佳酶解条件为酶解温度47. 74 ℃、酶解pH 4. 81、酶解时间1 h,预测壳聚糖酶解物的DPPH 自由基清除率为65. 10%,总还原力为0. 323。在酶解温度48. 00 ℃、酶解pH4. 80、酶解时间1 h条件下重复试验得壳聚糖酶解物的DPPH 自由基清除率为65. 43%±0. 71%,IC50 为1. 86 mg/ mL±0. 10 mg/ mL;总还原力为0. 328±0. 010,相当于39. 44 μg/ mL±2. 94 μg/ mL 抗坏血酸的还原能力,该壳寡糖的平均分子质量为1 603 u,产率为45. 07%±3. 52%,为抗氧化活性壳寡糖的研制提供理论参考。


    相关文章 | 计量指标
    高纯度纤溶酶-α2-纤溶酶抑制剂和凝血酶-抗凝血酶复合物的制备
    周帅辉, 王伟杰, 余 正, 任 和, 李帅鹏, 杨艳坤, 白仲虎
    2022 (1):  110.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 110
    摘要 ( 272 )   PDF  

    为获得纤溶酶-α2-纤溶酶抑制剂(plasmin-α2-plasmin inhibitor complex,PIC)与凝血酶-抗凝血酶(thrombinantithrombin,TAT)单克隆抗体及建立相应复合物的检测方法,需要制备高纯度的PIC 与TAT 复合物。以脂血血浆为研究材料,进行血浆前处理,通过尿激酶激活血浆,经Lysinesepharose 亲和层柱,最后获得高纯度的PIC;处理过的血浆经过氯化钡吸附、饱和硫酸铵沉淀后,获得抗凝血酶(antithrombin,AT)与凝血酶原(prothrombin,Pro-T);采用Ecarin 蛇毒激活Pro-T 获得T,将T 与AT 分别通过Heparin-sepharose 亲和柱以提高其纯度,使其在体外混合反应得到TAT 混合物,再经Heparin-sepharose 亲和柱除去未反应的T 与AT,最终获得高纯度TAT。通过SDS-PAGE、紫外分光光度法与HISCL 自动分析仪对产物进行鉴定与定量。结果表明: PIC 最佳激活条件为2 mg 尿激酶/100 mL 血浆,37 ℃激活30 min,最终获得2. 5 mg PIC,经SDS-PAGE 鉴定纯度在90%以上;Pro-T 的激活条件为0. 5 mL 蛇毒/100 mL 血浆,37 ℃激活20 min,从100 mL 血浆中获得2. 1 mg T 与6. 2 mg AT;T 与AT 体外最佳反应质量比例为0. 7 ∶ 1,经SDS-PAGE 鉴定TAT 的纯度在80%以上。


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    教学研究
    PBL 联合翻转课堂教学法在医学分子生物学实验教学中的探索和应用
    晏贤春, 曹秀丽, 卜 歆, 韩 骅, 梁 亮
    2022 (1):  115.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 115
    摘要 ( 227 )   PDF  
    从解决“Dll4 胞外区重组蛋白是否能抑制内皮细胞血管形成”这一实际问题出发,探讨基于PBL 结合翻转课堂教学法在医学分子生物学实验教学中的应用。与传统孤立地讲授和实施分子生物学实验技术不同,该教学法通过解决科学问题,将DNA 提取、PCR、核酸电泳、胶回收等多种常用分子生物学实验技术有机整合,一方面强化实验技术的实际应用,另一方面结合翻转课堂教学模式,进一步增强学生的积极性,提升学生对知识探索的主观能动性,最终达到切实提高学生发现问题、分析问题和解决问题的教学目标。
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    基于文献计量学分析的沉浸式媒体技术下生物学教学研究热点
    杜 慧, 柏江竹, 王 懂, 周荣庭
    2022 (1):  118.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 118
    摘要 ( 208 )   PDF  

    为考察沉浸式媒体技术在生物学教学中的理论研究和发展应用情况,研究借助共词分析和共现分析等文献计量手段以及知识图谱等方法,通过梳理国内外权威数据库中的相关研究文献,介绍此领域发文量增长趋势,并分析发文量领先的科研机构及相关研究团队。通过共词分析探索此领域中的研究热点:国内的热点包括教学改革、虚拟实验和相关应用场景;而国外的热点包括教育和环境、分子可视化和认知与心理学相关研究。以期为生物学教学的研究者和实践者提供参考和启发。


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    T 载体表达蛋白的分子生物学综合实验设计
    戴 谷, 陶年娇, 朱 丹, 石 力
    2022 (1):  123.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 123
    摘要 ( 227 )   PDF  
    为弥补传统分子生物学实验中α-互补法筛选重组子以及蛋白质的原核诱导表达两项实验相对独立、缺乏连续的不足,探索通过设计基因克隆和蛋白表达一体化的综合性实验,以强化学生对阅读框的认识。分子生物学实验中的综合性实验设计拓展了实验教学的广度与深度,为进一步提升学生的知识、能力和素养奠定基础。
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    立足方法学基点 培育生物信息学素养
    李 勃, 何 昊, 张晓曦, 李映红, 杨 丹
    2022 (1):  127.  doi: 10. 3969/ j. issn. 2095-1736. 2022. 01. 127
    摘要 ( 240 )   PDF  
    以方法学为切入点,结合现代生命科学的发展与科研实践,运用试验-对照比较、距离与相似性、特征提取与特征选择、聚类分析、分类预测、数据整合再分析,以及数据库和在线工具等多个重要生物信息学策略或方法,帮助学生在较短的时间内学习和了解有别于传统实验生物学的计算思维与方法,加深学生对生物学交叉学科研究手段的理解。通过在生物学相关课程讲授过程中对生物信息学研究方法的引入,强化高校生物学相关专业学生的数理思维和交叉学科知识的运用能力,提升本科生的培养质量。
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