脱细胞猪小肠黏膜下层基质中纤维连接蛋白定量检测方法研究
- 1. 北京博辉瑞进生物科技有限公司， 北京 100026； 2. 中国科学院 过程工程研究所 生化工程国家重点实验室， 北京 100190； 3. 河南科技学院 生命科技学院，新乡453003
Quantitative detection of fibronectin in porcine small intestinal submucosa extracellular matrix
- 1. Beijing Biosis Healing Biological Technology Co., Ltd., Beijing 100026; 2. State Key Laboratory of Biochemical Engineering, Institute of Process Engineering, CAS, Beijing 100190; 3. School of Life Science and Technology, Henan Institute of Science and Technology, Xinxiang 453003, China
摘要： 采用分批次酶解和高效液相色谱与质谱分析联用技术（HPLC-MS）对脱细胞猪小肠黏膜下层（p-SIS）基质材料中纤维连接蛋白（FN）进行了定量检测。分批次酶解消除了静态酶解时间长、酶解效率低的不足，将酶解时间从96 h缩短至6 h，降解率可以达到95%以上。采用胰蛋白酶特异性酶解得到猪源FN的一个特征多肽为SSPVVIDASTAIDAPSNLR，HPLC-MS对这一特征肽段定量检测结果表明，VIDASISTM和Biodesign两种脱细胞材料中FN的含量分别为0.43%和0.17%。方法学实验证明该方法精确度较高(RSD为1.31%)。结果表明基于质谱的分析技术可有效检测脱细胞基质中FN含量。