生物学杂志

生物学杂志 ›› 2021, Vol. 38 ›› Issue (2): 32-.doi: 10.3969/j.issn.2095-1736.2021.02.032

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一种甘露糖醛酸C⁃5差向异构酶的Loop区域结构对酶活性的影响

  

  1. 1.大连海事大学交通运输工程学院，大连116026；2.中国科学院大连化学物理研究所 辽宁省碳水化合物重点实验室天然产物与糖工程研究组，大连116023
  • 出版日期:2021-04-18 发布日期:2021-04-25
  • 通讯作者: 阎圣刚，博士，教授，研究方向为高分子材料， E⁃mail：yanshenggang@dlmu.edu.cn；尹恒，博士，研究员，研究方向为糖生物学和糖工程， E⁃mail：yinheng@dicp.ac.cn
  • 作者简介:孙明，硕士研究生，研究方向为生物酶的利用， E⁃mail：sunxiaomingdlmu@163.com
  • 基金资助:
    国家重点研发计划（2017YFD0201302）；国家自然基金（31770847）；农业部海藻类肥料重点实验室开放基金资助项目（MAKLSF1802）

Effect of Loop on one kind of mannuronan C⁃5 epimerase􀆳s activity

  1. 1. College of Transportation Engineering， Dalian Maritime University， Dalian 116026， China； 2. Natural Products & Glycoconjugate Research Group， Liaoning Provincial Key Laboratory of Carbohydrates，Dalian Institute of Chemical Physics， Chinese Academy of Sciences， Dalian 116023， China
  • Online:2021-04-18 Published:2021-04-25

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摘要： 利用大肠杆菌（Escherichiacoli）表达系统，成功异源表达并纯化了来自Pseudomonassyringae的一种周质甘露糖醛酸C⁃5差向异构酶AlgG_PSEAM及其loop439⁃455截短体。通过对产物进行分析发现，截去loop439⁃455后，该甘露糖醛酸C⁃5差向异构酶的活性提高了14.7%。进一步分析，发现AlgG_PSEAM同时具有褐藻多糖裂解酶活性且通过测定其裂解酶活性发现，截去loop439⁃455后，裂解酶活性提高了23.3%。截去loop439⁃455，可同时提高AlgG_PSEAM的甘露糖醛酸C⁃5差向异构酶和褐藻多糖裂解酶活性。

关键词: loop, 异源表达, 甘露糖醛酸C?5差向异构酶, 褐藻多糖裂解酶

Abstract: The periplasmic proteinAlgG_PSEAMand itsloop439⁃455⁃truncation fromPseudomonassyringaewere successfully heterologously expressed. It was found that the epimerase activity was increased by 14.7% after removing theloop439⁃455. Through further investigation， it was found thatAlgG_PSEAMalso had alginate lyase activity and the alginate lyase activity also increased by 23.3% after removing theloop439⁃455. Therefore， two functional activities of the enzyme can be improved by removing the loop.

Key words: loop；heterologous expression；mannuronan C?5 epimerase；alginate lyase  ,

中图分类号: