摘要: 本研究利用荧光定量PCR法测定哈维弧菌(Vibrio harveyi)基因组内16S rRNA基因拷贝数。基于16S rDNA、pyrH、rpoA和recA4个基因的系统发育学分析鉴定弧菌菌株,然后通过重叠PCR构建包含哈维弧菌模式菌株16S rDNA和gyrB基因片段的标准质粒,建立了定量PCR测定细胞内16S rRNA基因拷贝数方法,并测定了6株测试菌株和哈维弧菌模式株的16S rRNA基因拷贝数,同时以已知拷贝数的菌株ATCC BAA-1116做对照。6个测试菌株均为哈维弧菌。菌株ATCC BAA-1116的16S rRNA基因拷贝数为11个,与已知值相符。模式菌株MCCC 1H00031T和6个测试菌株SXB-C、SCB-4、NBV00029、NBV00035、NBV00039、NBV00269的拷贝数分别为9、12、13、12、11、13和9个。利用荧光定量PCR法测定哈维弧菌基因组内16S rRNA基因拷贝数的方法简单可行。哈维弧菌16S rRNA基因拷贝数的种内变异可能是其适应近岸多变生境的原因之一。