%A 赵德蕊,廖怡,刘苗苗,杨青山,吴家文 %T 苦参双功能核酸酶1的体外表达及结构性质分析 %0 Journal Article %D 2019 %J 生物学杂志 %R 10.3969/j.issn.2095-1736.2019.02.017 %P 17- %V 36 %N 2 %U {http://www.swxzz.com/CN/abstract/article_625.shtml} %8 2019-04-18 %X 植物双功能核酸酶1影响植株生长、发育及衰老,且研究表明其具有抗肿瘤活性。基于苦参转录组数据克隆了苦参 (Sophora flavescens Ait.)中双功能核酸酶1基因的开放读码框 (SfBFN1),分析其编码蛋白的理化性质和结构特点。采用RT-PCR方法扩增SfBFN1基因片段,纯化后与pET22b (+) 载体连接并转化到大肠杆菌感受态细胞BL21,并以不同的诱导条件,筛选其体外表达的最适宜条件。结果获得了SfBFN1的开放读码框片段,长度为984 bp,编码327个氨基酸,SfBFN1蛋白分子质量约为36.2 ku;利用PHYRE2在线软件预测SfBFN1蛋白的部分三级结构,其富含α螺旋与β折叠,5个α 螺旋包裹着7个β折叠,构成了蛋白质立体结构的框架。研究为SfBFN1蛋白开发成为抗癌蛋白质药物制剂奠定了实验基础。